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比较研究
.2003年8月26日;42(33):9959-69.
doi:10.1021/bi0345283。

Ubc9的N末端位点在SUMO-1、-2和-3结合和共轭中的作用

附属机构
比较研究

Ubc9的N-末端位点在SUMO-1、-2和-3结合和结合中的作用

迈克尔·H·塔塔姆等。 生物化学. .

摘要

目标蛋白与泛素和泛素样蛋白的共价翻译后修饰调节许多重要的细胞过程。然而,这些蛋白质被激活并与底物结合的分子机制尚不完全清楚。核磁共振研究表明,泛素样蛋白SUMO-1、-2和-3与E2结合酶Ubc9的相同N末端区域以相似的亲和力相互作用。这与Ubc9在SUMO结合途径中几乎相同的利用有关。为了研究这种相互作用的功能意义,采用定点突变改变Ubc9 SUMO结合表面的残基,并通过等温滴定量热法和生化分析研究氨基酸取代对SUMO-1和靶蛋白RanGAP1结合和偶联的影响。Ubc9中R13A/K14A和R17A/K18A突变破坏了与SUMO-1的相互作用,但没有完全消除与E1的相互作用。虽然这些Ubc9突变体在SUMO-1从E1转移到E2的过程中表现出明显降低的效率,但它们识别底物并将SUMO-1由E2转移到目标蛋白的能力不受影响。这些结果表明,SUMO-1在Ubc9上的非共价结合位点虽然远离活性位点,但对SUMO-1从E1向E2的转移很重要。E2酶在泛素和泛素样蛋白途径中的保护作用表明,E2酶的类似N末端位点通常可能具有类似的作用。

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