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.2002年6月15日;115(第12部分):2485-95。
doi:10.1242/jcs.115.12.2485。

ASIP/PAR-3参与促进上皮紧密连接形成

附属公司

ASIP/PAR-3参与促进上皮紧密连接形成

Tomonori Hirose公司等。 细胞科学杂志. .

摘要

哺乳动物蛋白ASIP/PAR-3与非典型蛋白激酶C同型(aPKC)相互作用,并显示出与无脊椎动物蛋白秀丽线虫PAR-3和果蝇Bazooka的整体序列相似性,这对在各种细胞中建立极性至关重要。ASIP/PAR-3和aPKC之间的物理相互作用在秀丽线虫PAR-3和PKC-3以及果蝇Bazooka和DaPKC中也保持不变。在哺乳动物中,ASIP/PAR-3与aPKC共定位并集中在上皮细胞的紧密连接处,但ASIP/PAR-3在紧密连接处的生物学意义尚待阐明。在本研究中,我们发现ASIP/PAR-3染色分布于上皮细胞-细胞连接的尖端下区域,包括不太发育紧密连接的上皮细胞,与另一种紧密连接相关蛋白ZO-1形成鲜明对比,ZO-1在发育良好紧密连接的细胞中染色更强。免疫金电子显微镜显示ASIP/PAR-3集中在紧密连接的顶端边缘,而ZO-1沿着紧密连接分布。为了阐明ASIP这种特征性定位的意义,我们分析了过度表达的ASIP/PAR-3对培养的上皮MDCK细胞紧密连接形成的影响。当根据跨上皮电阻和闭塞素不溶性进行评估时,ASIP/PAR-3的诱导过表达,而不是其缺失aPKC结合序列的缺失突变,促进了MDCK细胞中细胞间接触诱导的紧密连接形成。aPKC结合序列在紧密连接形成中的重要性也得到了以下发现的支持:在MDCK细胞紧密连接形成的初始阶段,该序列中保守的PKC磷酸化位点ASIP-Ser827在细胞-细胞接触的最顶端被磷酸化。总之,我们目前的数据表明ASIP/PAR-3通过与aPKC的相互作用积极调节上皮紧密连接的形成。

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