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.1999年9月;1(5):298-304.
doi:10.1038/13014。

动力相关GTPase Dnm1调节酵母线粒体分裂

附属公司

动力相关GTPase Dnm1调节酵母线粒体分裂

W布莱扎德等。 Nat细胞生物学. 1999年9月.

摘要

动力蛋白相关的GTPase Dnm1控制酵母中的线粒体形态。这里我们显示,dnm1突变将线粒体室转化为一个由相互连接的小管组成的平面“网络”。我们认为这种净形态是由线粒体分裂缺陷引起的。免疫金标记将Dnm1定位于似乎正在分裂的收缩线粒体小管的细胞质表面和最近完成分裂的线粒体小管末端。Dnm1的活性与Fzo1的活性上位,后者是线粒体外膜中的一种GTPase,调节线粒体融合。dnm1突变可防止fzo1突变株的线粒体断裂。这些发现表明,Dnm1调节线粒体分裂,在线粒体小管的细胞质表面聚集分裂发生的位置。

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数字

图1
图1。线粒体膜在dnm1突变细胞
GFP标记线粒体膜(pDO12)的形态学b条,野生型(菌株JSY3096),,(f),dnm1Δ(JSY3097),小时,mdm20型Δ(JSY3094),以及j,dnm1Δmdm20型25°C时的Δ(JSY3095)电池。相应的差分干涉对比度图像如所示,c(c),e(电子),,四个菌株是来自一个四分体的姊妹孢子。比例尺代表5μm。
图2
图2
线粒体膜形态dnm1型Δ和dnm1Δ百万美元20Δ突变细胞。
图3
图3。线粒体网络的透射电镜和序列重建
,通过线粒体网(m)在dnm1Δmdm20型Δ电池(JSY3095菌株)。黑色箭头标记线粒体室中的“洞”。b条,由12个连续切片生成的线粒体网络(灰色和白色)的计算机重建,包括中所示的图像。比例尺代表1μm。
图4
图4。Dnm1定位于线粒体收缩位点和线粒体尖端
Dnm1–HA的分布c(c)p蛋白(黑箭头;JSY1781菌株)通过超薄冰冻切片的免疫金标记进行测定。发现金颗粒集中在靠近质膜的线粒体小管尖端(b条,c(c),(f))位于线粒体小管顶端,可能会被新分裂(,e(电子),小时)和推测的线粒体收缩/分裂位点(i–l).,在线粒体上未收缩的部位也检测到金颗粒。,在缺乏Dnm1–HA的细胞中未检测到线粒体标记c(c)p蛋白(菌株JSY3097)。m、 线粒体;pm,质膜;v、 液泡。比例尺代表0.1μm。
图5
图5。dnm1突变阻断线粒体断裂fzo1-1型单元格
GFP标记线粒体膜(携带质粒pVT100UGFP)的形态b条,野生型(菌株JSY3162),,fzo1-1型(JSY3161),(f),dnm1Δ(JSY3164),以及小时,j,dnm1Δfzo1-1型(JSY3163)电池,37°C。相应的差分干涉对比度图像如所示,c(c),e(电子),,四个菌株是来自一个四分体的姊妹孢子。比例尺代表5μm。
图6
图6。线粒体膜形态dnm1dnm1 fzo1-1突变细胞
星号表示5%的dnm1Δfzo1-1型37°C时,电池内有可见的网络。
图7
图7。线粒体融合在dnm1 fzo1-1单元格
野生型(a–d),fzo1-1型(e–h),dnm1型Δ (i–l)和dnm1型Δfzo1-1型(百万英镑)相反交配类型的细胞用丝裂原-GFP标记(b条,(f),j,n个)或MitoTracker CMXRos(c(c),,k个,o个)并在37°C下交配。通过共焦显微镜获得合子图像,并通过检查重叠的mito-GFP和MitoTracker图像评估线粒体融合(,小时,,第页)。中的“z”指定中显示的受精卵j–l。比例尺代表2μm。

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引用人

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    1. Williamson DH等。《线粒体遗传学、生物发生学和生物能量学》。Bandlow W,Schweyen RJ,Thomas DY,Wolf K,Kaudewitz F,编辑。沃尔特·德格鲁伊特(Walter de Gruyter);柏林:1976年。第99–115页。
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