查洛普科娃,T.普鲁德尼科娃,P.雷扎科娃,Z.普罗科普,T.库德拉科娃,L.丹尼尔,J.布雷佐夫斯基,W.Ikeda-Ohtsubo公司,Y.佐藤,M.库蒂,Y.Nagata(永田),I.库塔·斯马塔诺娃和J.丹博斯基 新型卤代烷脱卤酶DbeA的晶体结构埃氏慢生根瘤菌美国农业部94号报告显示,蛋白质内部存在两个氯离子。第一个卤化物结合位点参与底物结合,并存在于所有结构特征的卤代烷脱卤酶中。第二个卤化物结合位点是DbeA独有的。为了阐明第二个卤化物结合位点在酶功能中的作用,构建并表征了缺乏该位点的两点突变体。这些替换导致底物特异性类别的改变,并伴随着酶活性、稳定性的降低和底物抑制的消除。酶催化活性的变化归因于催化组氨酸碱度较低介导的速率限制水解步骤的减速。