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在航天飞机上的先进蛋白质结晶设备(APCF)中,使用改进的自由界面扩散(FID)反应器,生长了高质量的四方蛋清溶菌酶晶体特别的具有更长的扩散路径。这种设计可以实现真正的反扩散实验。在50年前定义的经典化学条件下,用NaCl作为结晶剂,乙酸盐pH 4.5作为缓冲液,获得晶体。反扩散结晶允许对生长条件进行“物理”而非化学优化:事实上,这种方法在一次试验中筛选出最佳过饱和条件,并产生质量非常高的晶体。利用DESY-EMBL光束线的同步辐射,从其中一个晶体中以原子分辨率收集完整的衍射数据集。整体R(右)合并在分辨率范围31-0.94Ω内的强度为5.2%,数据完整率为98.9%。通过这些程序进行了改进中枢神经系统SHELX公司97至最终结晶学R(右)72390次反射的系数为12.26%。原子位置的平均标准不确定度为0.024Ω,通过块最小二乘矩阵的反演进行估算。22条侧链显示出交替构象,环59-75在同一晶体中采用了两种构象,这两种构像在以前的高分辨率研究中是为三斜或四方溶菌酶观察到的。除255个水分子外,结晶剂(一个六配位钠离子和五个氯离子)参与有序溶菌酶水合壳。

支持信息

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可移植文档格式(PDF)文件https://doi.org/10.107/S090744901008873/li0396sup1.pdf
补充材料

PDB参考:四方溶菌酶


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