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图1。

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HUVEC中FRS2α的敲除抑制VEGF-A165–依赖信号。(一个)对照组和FRS2α敲低的HUVEC隔夜血清饥饿,并用VEGF-A治疗165(50纳克/毫升)。用抗VEGFR2抗体免疫沉淀细胞裂解物(IP),并用抗对酪氨酸抗体免疫印迹。将相同的印迹剥离并用抗VEGFR2印迹。用抗VEGFR2和抗FRS2α抗体印迹输入裂解产物。(B类)对照组和FRS2α敲低的HUVEC隔夜血清饥饿,并用VEGF-A治疗165(50纳克/毫升)。用p-VEGFR2、VEGFR2,p-ERK、ERK和FRS2α抗体对细胞裂解物进行印迹。(C类)对照组和FRS2α-6F(Flag)过度表达的HUVEC隔夜血清饥饿,并用VEGF-A治疗165(50纳克/毫升)。用p-VEGFR2、VEGFR2,p-ERK、ERK和Flag(FRS2α)抗体对细胞裂解物进行印迹。(D类)对照组和FRS2α敲低的HUVEC隔夜无血清。细胞增殖(左侧)和细胞迁移(赖特)响应VEGF-A165xCELLigence检测到的(50 ng/mL)曲线。每孔重复加载约1000个细胞(用于细胞增殖)或25000个细胞(用来细胞迁移)(***P(P)与对照组相比<0.01)。(E类)体外基质:在对照组和FRS2α敲除的HUVEC上放置生长因子缺失的基质,并暴露于VEGF-A,评估脐带分支的程度165(50纳克/毫升)。中的数据一个C类E类基于三个独立的实验;中的数据D类基于两个独立的实验。

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