GATOR是一种Rag相互作用复合物，其Mios成分是氨基酸激活mTORC1所必需的。(A类)Mios与内源性RagA和RagC相互作用。将所示cDNA转染到HEK-293T细胞的表达载体中。用细胞可渗透的化学交联剂处理细胞，制备裂解物并进行Flag免疫沉淀（IP），然后对所指示的蛋白质进行免疫印迹。(B类)Mios是氨基酸激活mTORC1途径所必需的。将表达靶向GFP或Mios的shRNAs的HEK-293T细胞饥饿50分钟或饥饿，然后用氨基酸重新刺激10分钟。分析细胞裂解物中S6K1的磷酸化状态。(C)用靶向Mio或GFP的dsRNAs处理S2细胞后，氨基酸饥饿90分钟或饥饿并用氨基酸重新刺激30分钟。通过免疫印迹法检测所示蛋白。(D类)dsRNA介导的Mio耗竭后S2细胞的细胞大小直方图(E类)–(F类)GATOR是由两个不同的亚复合物定义的八元复合物，与Rag GTPases相互作用。HEK-293T细胞被转染并按(A类)在排除交联试剂的情况下，对细胞裂解物和FLAG免疫沉淀物进行免疫印迹。(G公司)裂解稳定表达FLAG标记的DEPDC5或WDR24的HEK-293T细胞，通过免疫印迹分析内源性RagA、RagC、Mios和Nprl3的细胞裂解物和FLAG免疫沉淀物。(H（H）)概述GATOR-Rag相互作用的示意图。GATOR2（Mios、Seh1L、WDR24、WDR59和Sec13）与GATOR1（DEPDC5、Nprl2和Nprl3）相互作用，然后可能会绑定Rags。
