图2

一，中性粒细胞标记和分析示意图。造血祖细胞是从野生型（WT）或密尔-223^-/Y（Y）（KO）雄性小鼠，在含有粒细胞集落刺激因子（G-CSF）和干细胞因子（SCF）的SILAC培养基中培养6天。为了增强分化，在接下来的42小时内提取SCF。混合成熟的中性粒细胞，并对蛋白质进行分级以进行定量MS分析。还从培养物和直接从小鼠中收集mRNA用于表达谱分析。b条，密尔-223用RNA印迹探针检测miR-223的表达。一个印迹分析了来自培养的细胞的分类亚群的总RNA在体外（左，排序配置文件显示在最左侧）。另一个杂交分析了培养细胞的总RNA在体外8天，从骨髓中直接分离出的中性粒细胞（右）。作为负荷控制，对U6小核RNA进行了重复印迹。每个印迹下面是相对表达水平，使用负荷控制进行了标准化。还显示了放射性标记的RNA标记（M）。c（c），直接从小鼠分离的中性粒细胞分析（左）在体外从造血前体细胞（右），监测miR-223缺失对其3′UTR中具有单个miR-222位点的信息的影响。Plotted是至少更改到x个轴，否则如图1c.d日，来自miR-223 7-8分子3′-UTR位点信息的上调蛋白的比例，如图所示图1b.e（电子），删除的影响密尔-223在中性粒细胞蛋白质上，考虑到来自消息的蛋白质在其3′UTR中具有单个miR-223位点，如图所示图1c.（f），ORF的靶向功效(n个=69）和3′UTR(n个=50），按图1e.克，单个7-8个位点和多个位点的疗效，如图所示（f）.