| 资料来源： |
人类细胞 |
| 物种： |
食蟹类 |
| 制备方法： |
转基因细胞在收集前培养48小时。细胞在含有蛋白酶抑制剂混合物的改良RIPA缓冲液中进行裂解。通过离心去除细胞碎片，然后离心以澄清裂解液。将细胞裂解液在1 x SDS样品缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 6.8，12.5%甘油，1%十二烷基硫酸钠，0.01%溴酚蓝）中煮沸5分钟，并冷冻干燥。 |
| 溶解缓冲液： |
改良RIPA裂解缓冲液：50mM Tris-HCl pH 7.4，150mM NaCl，1mM EDTA，1%Triton X-100，0.1%SDS，1%脱氧胆酸钠，1mM PMSF |
| 质量控制测试： |
12.5%SDS-PAGE考马斯蓝染色 |
| 推荐用法： |
1.离心管几秒钟，确保颗粒位于管底部。使用200μL纯水重新溶解颗粒，并煮沸2-5分钟。储存于-80°C。建议将细胞裂解液等分为较小数量，以实现最佳储存。避免重复冻融循环。注：裂解液已准备好装入SDS-PAGE进行Western blot应用。如果需要解离条件，则在加热之前添加还原剂。 |
| 稳定性： |
样品自收到之日起在-80°C下稳定12个月 |
| 存储缓冲区： |
50 mM Tris-HCl pH 7.4，150 mM NaCl，1mM EDTA，1%Triton X-100，0.1%SDS，1%脱氧胆酸钠，1mM PMSF |
| 存储说明： |
当储存在-80°C下时，裂解液样品自收到之日起稳定12个月。避免重复冻融循环。在SDS-PAGE分级之前，将裂解物煮沸5分钟。 |
