主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR904(2)]至IRS2 适用于:流式细胞周期(内部)、WB、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[EPR904(2)]至IRS2 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 人类IRS2 aa 1300中的合成肽到C末端(C末端)。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:HEK293、HEK291(胰岛素治疗)、NIH/3T3(胰岛素处理)和SH-SY5Y细胞裂解物; A375(人恶性黑色素瘤上皮细胞)和A549全细胞裂解物 IHC-P:人体肾脏、乳房和肌肉组织以及大鼠肾脏组织。 ICC/IF:SH-SY5Y单元。 HEK293 WT细胞(HEK293-IRS2 KO用作阴性细胞系)。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 运输温度为4°C。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR904(2) -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用程序
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目标
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功能 可能通过胰岛素调节各种细胞过程的控制。 -
序列相似性 包含1个IRS类型的PTB域。 包含1个PH域。 -
翻译后 修改 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 -
细胞定位 细胞质>胞浆。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 胰岛素受体底物2抗体 IRS 2抗体 IRS-2抗体
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图像
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所有车道: 1/1000稀释的抗-IRS2抗体[EPR904(2)](ab134101) 车道1: 野生型HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: IRS2敲除HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: A-375细胞裂解物 车道4: A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 137千帕 观察到的频带大小: 160千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在160 kDa下观察到ab134101。 红色-装载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55kDa时观察到。 western blot显示ab134101与野生型HEK-293细胞中的IRS2反应,在IRS2敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型和IRS2敲除的HEK-293细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab134101和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab134101染色野生型HEK293细胞中的IRS2(顶面板)和IRS2敲除的HEK292细胞(底面板)。 细胞用4%多聚甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与ab134101以1/500孵育 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在+4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
SH-SY5Y细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析用纯化的ab134101在1/300标记IRS2。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 ab150120型 ,Alexa Fluor ® 还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)。 对照1:一级抗体(1/300)和二级抗体, ab150120型 ,Alexa Fluor ® 594缀合的山羊抗小鼠IgG(1/1000)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/1000)。 -
大鼠肾脏组织标记IRS2的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,纯化的ab134101为1/500。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
人肾组织标记IRS2的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,纯化的ab134101为1/500。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
人体肌肉组织标记IRS2的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,使用稀释1/50的未纯化ab134101。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
用稀释度为1/50的未纯化ab134101标记IRS2的人类乳腺组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗IRS2抗体[EPR904(2)](ab134101) 车道1: 大鼠肝裂解物 车道2: 人肝裂解物 3号车道: A375(人恶性黑色素瘤上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: NCI-H1299(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道6: LADMAC(小鼠骨髓单核-巨噬细胞)全细胞裂解物 7号车道: MDA-MB-231(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 第8车道: MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/20000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 137千帕 观察到的频带大小: 170-185千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 暴露时间: 左图像:180秒 右图:40秒 虽然一些论文支持在肝脏(PMID:302052)、A549(PMID:30988063)、NCI-H1299(PMID:3098806)、LADMAC(PMID:29115630)、MDA-MB-231(PMID:209685905)和MEF(PMID:00679431)中的表达,但即使在1:200的稀释度下,ab134101也无法检测到这些样品中的靶带。 -
1/5000稀释(纯化)的抗IRS2抗体[EPR904(2)](ab134101)+NIH/3T3全细胞裂解物-用20µg胰岛素处理 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/50000 预测的带宽大小: 137千帕 观察到的频带大小: 170-185千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 20µg抗IRS2抗体[EPR904(2)](ab134101)(纯化) 车道1: HEK293全细胞裂解物-未经处理 车道2: HEK293全细胞裂解物-用胰岛素处理 3号车道: SH-SY5Y全细胞裂解液 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/50000 预测的带宽大小: 137千帕 观察到的频带大小: 170-185千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
HeLa细胞的细胞内流式细胞术分析,用纯化的ab134101标记1/120(红色)的IRS2。 细胞用2%多聚甲醛固定。 以FITC-偶联山羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
重叠直方图显示HeLa细胞被未纯化的ab134101染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab134101,1/1000稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%多聚甲醛(10分钟)固定/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的HeLa细胞中发出阳性信号。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (26)
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