概述
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产品名称 人TGOLN2(TGN46)敲除A549细胞裂解物 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 A549型 -
有机体 人类 -
突变描述 CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=1 bp缺失,1 bp插入; 移帧:100% -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS),Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1个套件 ab280547-人TGOLN2敲除A549细胞裂解物 1 x 100微克 ab259782-人类野生型A549细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 癌 -
性别 男性
目标
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功能 可能参与调节进出跨高尔基网络的膜流量。 -
组织特异性 等位基因TGN46广泛表达。 TGN51异构体在胎儿肺和肾中更为丰富。 TGN48在胚胎肾和早幼粒细胞中几乎不表达。 -
手机定位 细胞膜。 高尔基体>反高尔基网络膜。 主要在转高尔基体网络中。转高尔基网络和细胞表面之间的循环通过内体返回。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 TGN 46号 TGN 51号 TGN38型
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应用
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图像
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CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=1 bp缺失,1 bp插入; 移帧:100% -
车道1: A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物(20 ug) 车道2: TGOLN2敲除A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物(20 ug) 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物(20 ug) 车道4: Hep G2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物(20 ug) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约174280 在80 kDa时观察到。 红色-装载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 约174280 Western blot显示在野生型A549细胞中与TGN46反应,在TGOLN2敲除细胞系中观察到信号丢失 约269510 (敲除细胞裂解物ab269672)。 对野生型A549和TGOLN2敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约174280 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
封闭和稀释缓冲液和浓度:3%NFDM/TBST。 样品: 车道1 :野生型A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物,40 ug 车道2 :TGOLN2(TGN46)敲除A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物,40 ug 3号车道 :HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物,20 ug 1-3车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色: ab271183年 在80-100kDa下观察到。 红色:装载控制 约8245 (小鼠单克隆[6C5]到GAPDH)在36 kDa时观察到。 1-2车道 : 约271183 Western blot显示在野生型A549细胞中与TGN46反应,在TGN46敲除细胞系中观察到信号丢失 约269510 (敲除细胞裂解物ab269672)。 对野生型A549和TGN46敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 约271183 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1/1000稀释度和1/20000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附液开发印迹( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载