主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 小鼠单克隆[G59-12]至p53 适用于:WB、IHC-P、Flow Cyt(Intra)、IP 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [G59-12]至p53 -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 老鼠,老鼠 -
完 重组片段。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1和HEK-293全细胞裂解物。 IHC-P:人类子宫内膜癌组织。 野生型HAP1细胞颗粒。 流式细胞周期(内部):亲代HAP1细胞。 IP:HEK-293全细胞裂解物。
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规则说明 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关详细信息 请看这里 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 在+4°C下短期储存(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),0.05%牛血清白蛋白,59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
发动机 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 G59-12型 -
同种型 IgG1 -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
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应用
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靶标
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功能 在多种肿瘤类型中起抑癌作用; 根据生理环境和细胞类型诱导生长停滞或凋亡。 作为一种反式激活剂参与细胞周期调节,通过控制这一过程所需的一组基因来负向调节细胞分裂。 其中一个激活的基因是周期素依赖性激酶的抑制剂。 凋亡诱导似乎是通过刺激BAX和FAS抗原表达或抑制Bcl-2表达介导的。 包含在Notch信号交叉中。 异构体2增强来自一些但不是所有TP53诱导启动子的亚型1的反式激活活性。 异构体4抑制反式激活活性并损害由异构体1介导的生长抑制。 异构体7抑制异构体1介导的凋亡。 -
组织特异性 无处不在的。 等位基因在广泛的正常组织中表达,但以组织依赖的方式表达。 同工酶2在大多数正常组织中表达,但在大脑、肺、前列腺、肌肉、胎脑、脊髓和胎肝中未检测到。 同工酶3在大多数正常组织中表达,但在肺、脾、睾丸、胎脑、脊髓和胎肝中未检测到。 同工酶7在大多数正常组织中表达,但在前列腺、子宫、骨骼肌和乳腺中未检测到。 仅在结肠、骨髓、睾丸、胎脑和肠中检测到8号异构体。 同工酶9在大多数正常组织中表达,但在大脑、心脏、肺、胎肝、唾液腺、乳腺或肠中未检测到。 -
疾病相关 注=TP53在多种转化细胞中含量增加。 TP53在大约60%的癌症中经常发生突变或失活。 在Barrett化生中发现TP53缺陷,即食管下部正常复层鳞状上皮被化生柱状上皮取代。 在大约10%的慢性胃食管反流病患者中,这种情况是一种并发症,容易发展为食管腺癌。 TP53缺陷是食管癌(ESCR)的原因[MIM:133239]。 TP53缺陷是Li-Fraumen综合征(LFS)的原因[MIM:151623]。 LFS是一种常染色体显性家族性癌症综合征,其经典形式是指先证者在45岁之前患有肉瘤,一级亲属在45岁以前患有任何肿瘤,另一级亲属则在45岁前患有任何肿瘤或任何年龄的肉瘤。 已经提出了LFS的其他临床定义(PubMed:8118819和PubMed:8718514),称为Li-Fraumeni-like综合征(LFL)。 在这些受影响的家庭中,亲属在异常的早期发展出一系列不同的恶性肿瘤。 TP53种系突变携带者中80%的肿瘤发生于四种类型的癌症:乳腺癌、软组织和骨肉瘤、脑肿瘤(星形细胞瘤)和肾上腺皮质癌。 较少见的肿瘤包括15岁之前的脉络丛癌或乳头状瘤、5岁之前的横纹肌肉瘤、白血病、Wilms肿瘤、恶性叶状瘤、结直肠癌和胃癌。 TP53缺陷涉及头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)[MIM:275355]; 也称为头颈部鳞状细胞癌。 TP53缺陷是肺癌(LNCR)的原因[MIM:211980]。 TP53的缺陷是脉络丛乳头状瘤(CPLPA)的一个原因[MIM:260500]。 脉络丛乳头状瘤是一种生长缓慢的脉络丛良性肿瘤,常侵犯软脑膜。 儿童通常位于侧脑室,而成年人则多位于第四脑室。 脑积水很常见,可能是由于梗阻或脑脊液肿瘤分泌物所致。 如果发生恶性转化,则称为脉络丛癌。 原发性脉络丛肿瘤很少见,通常发生在儿童早期。 TP53缺陷是肾上腺皮质癌(ADCC)的原因[MIM:202300]。 ADCC是一种罕见的儿童肾上腺皮质肿瘤。 在Beckwith-Weedemann综合征患者中发生频率增加,是Li-Fraumen综合征的组成肿瘤。 -
序列相似性 属于p53家族。 -
结构域 核输出信号起转录抑制域的作用。 TADI和TADII基序(残基17至25和48至56)对应于9aaTAD基序,它们是存在于大量酵母和动物转录因子中的反式激活域。 -
翻译后修饰 乙酰化。 CREBBP对Lys-382的乙酰化增强了转录活性。 SIRT1对Lys-382的去乙酰化损伤其诱导促凋亡程序和调节细胞衰老的能力。 Ser残基上的磷酸化介导转录激活。 通过HIPK1进行磷酸化(根据相似性)。 HIPK4在Ser-9的磷酸化增加了对BIRC5启动子的抑制活性。 VRK1对Thr-18进行磷酸化。 CHEK2对Ser-20进行磷酸化,以应对DNA损伤,从而防止MDM2泛素化。 TAF1对Thr-55进行磷酸化,促进MDM2介导的降解。 紫外线照射下,HIPK2在Ser-46上磷酸化。 CREBBP乙酰化需要Ser-46上的磷酸化。 在紫外线照射下,Ser-392被磷化,而不是γ射线照射。 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 紫外线照射下Ser-15的磷酸化; 通过与BANP的交互增强。 在Thr-55被PP2A-PPP2R5C全酶脱磷。 SV40小T抗原通过PP2A的AC形式抑制去磷酸化。 可能在C-末端碱性区发生O-糖基化。 在EB-1细胞系中研究。 MDM2和SYVN1泛素化,导致蛋白酶体降解。 RFWD3泛素化,与MDM2协同工作,可能催化p53/TP53上非蛋白酶体靶向的短聚泛素链的形成。 MKRN1在Lys-291和Lys-292处泛素化,导致蛋白酶体降解。 USP10脱去泛素,使其稳定。 TRIM24泛素化,导致蛋白酶体降解。 TOPORS的泛素化导致降解。 USP7脱除泛素,实现稳定。 异构体4以MDM2依赖的方式单泛素化。 SETD7在Lys-372处单甲基化,导致稳定并增加转录激活。 在Lys-370被SMYD2单甲基化,导致DNA结合活性和随后的转录调节活性降低。 Lys-372的单甲基化防止与SMYD2的相互作用以及随后在Lys-370的单甲基化。 通过EHMT1和EHMT2在Lys-373处二甲基化。 SETD8在Lys-382处单甲基化,促进与L3MBTL1的相互作用并导致抑制转录活性。 KDM1A对二甲基化Lys-370的去甲基化阻止了与TP53BP1的相互作用,并抑制了TP53介导的转录激活。 SUMO1进行酰化。 -
细胞定位 细胞质; 细胞质。 核心。 细胞核>PML体。 内质网。 与BANP的互动促进了核本地化。 与CHEK2一起加入PML机构; 核心。 细胞质。 大多数细胞定位于细胞核和细胞质。 在一些细胞中,细胞核内形成不同于核仁的病灶; 核心。 细胞质。 大多数细胞定位于细胞核,但在一些细胞的细胞质中发现; 核心。 细胞质。 主要定位于细胞核,细胞质中有少量染色; 核心。 细胞质。 以核为主,但用亚型4和细胞核表达时定位于细胞质。 细胞质。 以核为主,但在细胞应激后转移到细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 抗原NY-CO-13抗体 BCC7抗体 细胞肿瘤抗原p53抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗p53抗体[G59-12](ab308609) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物20µg 车道2: p53敲除HAP1全细胞裂解物20µg 次要 所有车道: 山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( 约216772 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 43千帕 观察到的频带大小: 53千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻隔和稀释缓冲液及浓度:用等体积的TBS稀释的Intercept®(TBS)阻隔缓冲液。 每车道20µg的裂解液。 样品在还原条件下在Bis-Tris凝胶上运行。 Western blot:抗p53抗体(ab308609)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体( 约181602 )以1/2000稀释度加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab308609被证明与p53特异结合。 在野生型HAP1细胞裂解物(1区)中观察到53 kDa的相关靶点,在p53敲除细胞裂解物中(2区)未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,首先将样品置于SDS-PAGE凝胶上,然后转移到固定化-FL PVDF膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗印迹,与二级抗体山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®800CW)和山羊抗兔IgG H&L(IRD®680RD)孵育( ab216777号 )在室温下以1/20000稀释1小时,再次清洗,然后成像。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗p53抗体[G59-12](ab308609) 车道1: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物20µg 车道2: Saos-2(人骨肉瘤上皮细胞)全细胞裂解物20µg 次要 所有车道: 过氧化物酶结合山羊抗鼠IgG(H+L)(1/10000稀释) 预测的带宽大小: 43千帕 观察到的频带大小: 53千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 阴性对照: Saos-2(PMID:1720229;PMID:9786925)。 在Western blot中,抗Vinculin抗体( ab129002号 )负载控制染色,稀释度为1/10000。 曝光时间:180秒。 -
对石蜡包埋的人类子宫内膜癌组织进行免疫组织化学分析,以1/100(10.28 ug/ml)的ab308609标记p53,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 主要是人类子宫内膜癌的核染色。 将切片在室温下与ab308609孵育30分钟,然后接种抗鼠IgG1抗体( ab125913型 )在LeicaDS9800试剂盒染色过程中持续8分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
对石蜡包埋细胞进行免疫组织化学分析,以1/100(10.28 ug/ml)的ab308609标记p53,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 主要在(A)野生型HAP1细胞颗粒上进行核染色,在(B)p53敲除HAP1的细胞颗粒上不进行染色。 将切片在室温下与ab308609孵育30分钟,然后接种抗鼠IgG1抗体( ab125913型 )在LeicaDS9800试剂盒染色过程中持续8分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
用ab308609在1/100(10.28 ug/ml)下标记p53的石蜡包埋人心肌组织的免疫组织化学分析,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 阴性对照: 人体心肌无染色。 将切片在室温下与ab308609孵育30分钟,然后接种抗鼠IgG1抗体( ab125913型 )在LeicaDS9800试剂盒染色过程中持续8分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
4%多聚甲醛固定90%甲醇渗透的p53 KO HAP1(人p53敲除慢性粒细胞白血病近单倍体细胞,左)/亲代HAP1细胞在1/1000稀释(0.1 ug)(红色)下用ab308609标记p53与小鼠单克隆IgG(黑色)的流式细胞术分析 同型对照和未标记对照(未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞)(蓝色)。 山羊抗鼠IgG(Alexa Fluor®647, ab150119号 )以1/5000稀释液作为二级抗体。 -
p53从0.35 mg HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解液中用ab308609以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)免疫沉淀。 使用ab308609在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 IP小鼠IgG(HRP)( 阿布131368 )以1/5000稀释度使用。 通道1:HEK-293全细胞裂解物 通道2:ab308609 IP in HEK-293全细胞裂解液 通道3:小鼠IgG1单克隆同型对照( 约18443 )代替HEK-293全细胞裂解液中的ab308609 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:23秒。 观察到的结合模式与文献中描述的一致(PMID:31045216;PMID:16131611)。
实验方案
数据表及文件
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