概述
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产品名称 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现基因敲除,第2外显子2 bp缺失,第2内显子73 bp插入,第2外显子8 bp缺失 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
经测试应用 -
生物安全水平 2 -
常规说明 建议控制: 人野生型HeLa细胞系( 约255928 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 子宫颈 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 Amelogenin X蛋白 D5S818:11,12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10 -
抗生素耐药性 嘌呤霉素1.00µg/ml -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶标
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功能 线粒体膜呼吸链NADH脱氢酶(复合物I)的副亚单位,被认为不参与催化作用。 络合物I在电子从NADH转移到呼吸链中起作用。 酶的直接电子受体被认为是泛醌。 参与干扰素/全反式维甲酸(IFN/RA)诱导的细胞死亡。 这种凋亡活性被病毒IRF1的相互作用所抑制。 防止STAT3靶基因的反式激活。 可能在CARD15介导的固有粘膜反应中发挥作用,并用于调节肠道上皮细胞对微生物的反应。 -
组织特异性 广泛表达,在心脏、骨骼肌、肝脏、肾脏和胎盘中表达最高。 在肠粘膜中,在克罗恩病和溃疡性结肠炎相关区域下调。 -
疾病相关 NDUFA13的缺陷可能是Hurthle细胞甲状腺癌(HCTC)易感性的一个原因[MIM:607464]。 Hurthle细胞甲状腺癌约占所有甲状腺癌的3%。 尽管它们被归类为滤泡性肿瘤的变体,但它们通常是多灶性的,并且比其他滤泡性癌更具侵略性,并且不太可能摄入碘。 -
序列相似性 属于复合物I NDUFA13亚基家族。 -
发展阶段 在许多胎儿组织中表达。 -
细胞定位 线粒体内膜。 核心。 在干扰素/类风湿关节炎治疗后可能移位到细胞核。 -
UniProt提供的信息
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KO细胞裂解物 -
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应用
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图片
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所有车道: 抗-GRIM19抗体[EPR4471(2)]( ab109017号 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: NDUFA13敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 17千Da 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab109017号 在17 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在36 kDa时观察到。 ab109017号 抗-GRIM19抗体[EPR4471(2)]在野生型HeLa细胞中与GRIM19特异性反应。 当敲除细胞系ab265863(敲除细胞裂解物 ab257136号 )已使用。 对野生型和GRIM19基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 2017年10月9日 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-GRIM19抗体[6E1BH7]( ab110240型 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: NDUFA13敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附( ab216777号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 17千Da 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab110240型 在17 kDa时观察到。 红色-加载控制 约181602 在36 kDa时观察到。 ab110240磅 GRIM19抗体[6E1BH7]在野生型HeLa细胞中与GRIM19特异性反应。 敲除细胞系ab265863(敲除细胞裂解物 ab257136号 )已使用。 对野生型和GRIM19基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab110240型 和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负荷控制( 约181602 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( ab216777号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:第2外显子8 bp缺失。 -
等位基因2:外显子2缺失2 bp。 -
等位基因3:在外显子2插入73 bp。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载