概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 A549型 -
有机体 人类 -
突变描述 CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=4 bp缺失; 移帧:100% -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS),Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 赖氨酸盐制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果你需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。有关如何制备裂解物的更多详细信息,请参阅我们的裂解方案。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 。 -
试验
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab280540-人HMOX1敲除A549细胞裂解物 1 x 100微克 ab259782-人类野生型A549细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 癌 -
性别 雄性
靶标
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功能 血红素加氧酶在α-亚甲基桥上裂解血红素环,形成胆绿素。 胆绿素随后通过胆绿素还原酶转化为胆红素。 在生理条件下,脾脏中血红素加氧酶的活性最高,衰老的红细胞被隔离和破坏。 -
序列相似性 属于血红素加氧酶家族。 -
细胞定位 微粒体。 内质网。 -
UniProt提供的信息 -
别名 32千D bK286B10型 D8Wsu38e型
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应用
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图片
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CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=4 bp缺失; 移帧:100% -
车道1: 人类野生型A549细胞裂解物(20 ug) 车道2: 人HMOX1(血红素加氧酶1)敲除A549细胞裂解物细胞裂解物(20 ug) 3号车道: 人脾组织裂解物(20 ug) 车道4: HL-60细胞裂解物(20微克) 车道5: MCF7细胞裂解物(20 ug) 车道6: HeLa细胞裂解物(20 ug) 7号车道: A549细胞裂解物(20 ug) 1-7车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约68477 在33 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约68477 Western blot显示与野生型A549细胞中的血红素加氧酶1反应,HMOX1敲除细胞系中观察到信号丢失 约269503 (敲除细胞裂解物ab269665)。 对野生型A549和HMOX1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约68477 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/10000和1/20000稀释。 将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。 -
车道1: 人类野生型A549细胞裂解物(20 ug) 车道2: 人HMOX1(血红素加氧酶1)敲除A549细胞裂解物细胞裂解物(20 ug) 3号车道: 人脾脏组织裂解物(20微克) 车道4: HL-60细胞裂解物(20 ug) 车道5: MCF7细胞裂解物(20 ug) 车道6: HeLa细胞裂解物(20 ug) 7号车道: A549细胞裂解物(20微克) 1-7车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约52947 在33 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 约52947 Western blot显示与野生型A549细胞中的血红素加氧酶1反应,HMOX1敲除细胞系中观察到信号丢失 约269503 (敲除细胞裂解物ab269665)。 对野生型A549和HMOX1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约52947 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,稀释率分别为1:2000和1:20000。 将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载