生物技术

使用市售啤酒桶等耐压容器的大量培养

在氧气存在的环境下不能生长的绝对厌氧性细菌,广泛地栖息在土壤等自然环境和人的肠道中,在环境净化、能源生产、健康护理领域,其利用备受期待。另一方面,绝对厌氧性细菌在20ml等小规模下可以稳定地进行培养,但是在20L等大规模的培养是困难的,厌氧状态的保持、培养设备的成本方面、培养物的搬运成为了课题。

NITE利用作为生物遗传资源保存机构培育的各种微生物的培养技术和知识,改良市售的啤酒桶(凯格)作为培养容器使用,开发了廉价、稳定地大量培养绝对厌氧性细菌的技术。具体来说,是在市售的啤酒桶的盖子上开孔,进行采样口和传感器口的改良,根据培养的微生物种类和培养物的用途安装仪器和阀门的方法(图1)。

详细情况可以提供信息,请咨询。

 

市售啤酒桶及盖子的改良照片
图1.通孔桶改良的一例

使用市售啤酒桶的培养方法

使用啤酒桶的培养基的准备和培养按照图2所示的顺序进行。本方法为小瓶等的小规模培养基制作步骤中新增高压釜后气体置换及冰水冷却步骤,可产生高厌氧状态,并可长期保持该状态。

该方法与能够以相同程度尺度保持厌氧状态的厌氧培养装置(炸药等)相比,能够以1/10左右的初始成本导入,能够容易地将培养物在活着的状态下连同容器一起搬运而且容器有可以进行高压釜灭菌,可以再利用等优点。

 

使用啤酒桶的培养基的准备和培养步骤。除了小规模的培养基制作步骤之外,在高压釜后追加新的气体置换和冷却步骤。
图2.使用过孔桶的培养基的准备和培养步骤

使用本培养方法的绝对厌氧性细菌的培养例

绝对厌氧细菌硫酸还原菌(Desulfovibrio vulgaris使用NBRC104121),比较了本培养方法(使用通孔桶的20L培养)和使用带丁基橡胶的20ml小瓶的培养方法。在37℃下培养7天,本培养方法的细胞数为109/ml,小瓶的细胞数(108个和/ml)相比,可以毫不逊色地稳定培养。

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