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.2022年5月20日；8（20）：eabi9366。
doi:10.1126/sciadv.abi9366。 Epub 2022年5月20日。

晚期妊娠和哺乳小鼠的嗅觉暴露导致雄性小鼠应激性镇痛

萨拉·F·罗森 1, 卢卡斯·利马 1, Civia Chen女士 1, 雷切尔·奈杰德 1, 赵梦怡 1, 瓦塔鲁·内莫托 1, Ece Toprak公司 1, 亚历克桑德里娜·斯科沃尔佐娃 1, 香农·N·坦斯利 1, 艾丽西亚·祖姆布什 1, Susana G Sotocinal公司 1, 夏洛特·皮特曼 1, 杰弗里·莫吉尔 1
附属公司

晚期妊娠和哺乳小鼠的嗅觉暴露导致雄性小鼠应激性镇痛

萨拉·F·罗森等。 科技进步. .

摘要

为了提高再现性，人们更加关注实验室环境中的潜在压力源。在这里，我们报告说，怀孕或哺乳期雌性小鼠的接近会导致嗅觉介导的应激诱导镇痛，对性腺完整的雄性小鼠产生各种有害刺激。我们表明，暴露于怀孕和哺乳期雌性小鼠尿液中释放的挥发性化合物会产生压力和相关的疼痛抑制。这种现象是一种新形式的女性对男性的化学信号传递，是由女性泌尿挥发物的气味标记介导的，例如n个-醋酸戊酯，可能是潜在的母体攻击信号，旨在防止陌生男性杀害婴儿。

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数字

图1。
图1：在辐射热爪子牵拉试验中，暴露于妊娠晚期和哺乳期小鼠的嗅觉对雄性而非雌性小鼠产生镇痛作用。
(A类和B类)雄性（A）和雌性（B）小鼠在暴露于各种生殖条件的刺激小鼠（幼稚雄性、幼稚雌性（NF）、早孕（EP）、妊娠晚期（LP）、哺乳期（哺乳期）[有幼崽（+幼崽），无幼崽存在（−幼崽在断奶前24小时（−幼犬24小时）和断奶后24小时移除幼犬。(C类和D类)在图（A）和（B）所示的所有刺激条件下，雄性（C）和雌性（D）小鼠的后爪-牵拉潜伏期（Post-Pre）的变化（Δ）。正值（绿色）表示镇痛；负值（粉红色）表示痛觉过敏。在所有图表中，显示了各个数据(n个=10至12只小鼠/性别/条件）；黑色条表示平均值±SEM*P（P）< 0.05, ***P（P）<0.001与零相比，双尾单样本学生t吨测试；如果t吨测试结果在P（P）多重比较校正后<0.05。
图2。
图2：在其他疼痛测试中，暴露于妊娠晚期和哺乳期小鼠的嗅觉对雄性小鼠产生镇痛作用，而对雌性小鼠则没有。
(A类)雄性（蓝色）和雌性（红色）小鼠暴露于以下条件的刺激小鼠引起的von Frey纤丝的后爪-牵拉阈值（g）变化（Δ）：幼稚雌性（NF）、妊娠晚期（LP）和哺乳期（哺乳期，有幼崽）。正值（绿色）表示镇痛；负值（粉红色）表示痛觉过敏。(B类)雄性（蓝色）和雌性（红色）小鼠在接触NF或LP刺激小鼠的同时腹腔注射0.9%乙酸（AA），表现出扭动（腹部收缩）行为。(C类)雄性（蓝色）和雌性（红色）小鼠暴露于NF和LP刺激小鼠之前和期间，小鼠Grimace评分（MGS）得分的变化（Δ）（0-2分）。在所有图表中，都显示了个别数据(n个=每种情况每种性别11至12只小鼠）；黑色条表示平均值±SEM*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001与零相比，双尾单样本学生t吨测试或两个样本t吨测试或如指示。如果经过多次比较修正后仍然有效，星号为红色（A）。
图3。
图3妊娠晚期/哺乳期镇痛的特点。
(A类)暴露于污秽床上用品的雄性小鼠从基线（Δ）潜伏期到从辐射热中排出的变化，该床上用品是从幼稚雌性（NF）或晚期妊娠（LP）小鼠的笼子中获得的。(B类)接触LP小鼠的性腺完整（Sham）或去势（TX）雄性小鼠从基线潜伏期到退出辐射热的变化。(C类)相对优势（Dom.）和从属（Sub.）小鼠暴露于LP小鼠后，从基线潜伏期到退出辐射热的变化，由试验前的一系列试管试验挑战确定。(D类)暴露于目前携带自己后代的LP小鼠或另一只天真雄性小鼠（陌生人）的LP小鼠，从基线潜伏期到退出辐射热的变化。(E类)暴露于LP小鼠120分钟以上的雄性小鼠从辐射热中退出的潜伏期时间过程，其中0是30分钟刺激暴露的开始。(F类和G公司)将雄性（F）和雌性（G）小鼠暴露于各种刺激小鼠（NF，幼稚雌性；EP，早孕；LP，妊娠晚期；哺乳期+幼崽）30分钟后的血浆皮质酮浓度[（CORT）；毫微克/毫升]。(H（H）)腹腔注射醋酸（+）或生理盐水（-）并暴露于NF或LP小鼠的雄性小鼠脊髓背角中c-Fos阳性细胞的数量。在所有图表中，显示了各个数据(n个=行为实验中每组10至12只小鼠；n个=CORT实验中每组5至7只小鼠）；黑条表示平均值±SEM*P（P）< 0.05, **P（P）<0.01，如图所示，或与（E）中的基线相比。ns，不显著。
图4。
图4晚期妊娠和哺乳小鼠尿液中高浓度的挥发性化学信号对雄性小鼠产生镇痛作用。
(A类)雄性小鼠在怀孕和哺乳期间暴露于气味（所有100μl体积）之前（Pre）和期间（Post），辐射热后爪爪缩水的潜伏期上调（1-辛烯-3-醇、4-庚酮、4-戊烯-1-醇和n个-乙酸戊酯）和阴性对照品蒸馏水和甲基（CH三)–己酸盐。(B类)在图（A）所示的所有刺激条件下，后爪与牵拉潜伏期（Post-Pre）的变化（Δ）；“+”表示上调挥发物；阴性对照以“−”表示）。(C类)暴露前和暴露期间（左），后掌的辐射热延迟，以及橄榄国家纯香蕉提取物（香蕉油）的延迟变化（右）。(D类)雄性小鼠暴露于不同浓度（百万分之几稀释在水中）的n个-乙酸戊酯涂抹于外鼻孔。(E类)暴露于不同浓度的n个-将乙酸戊酯涂抹于外鼻孔1至5分钟(F类)暴露于水（−）或100μln个-乙酸戊酯（+）。在所有图表中，显示了各个数据(n个=除水对照组外，每组8至12只小鼠；n个=CORT实验中每种浓度13至18；n个=OF实验中每组5至6个）；黑色条表示平均值±SEM*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001，双向，单样本t吨测试（与0相比；未修正），或如所示；如果t吨测试结果在P（P）多重比较校正后<0.05。
图5。
图5晚期妊娠和哺乳期雌性小鼠对繁殖活跃的陌生雄性小鼠的攻击性和尿液标记作出反应。
(A类)单个晚期妊娠或哺乳期雌性小鼠将刺激雄性置于改良的残余-内-内范式中的攻击延迟。刺激雄性小鼠为去势（TX）陌生小鼠、性腺完整的雄性小鼠（即雌性幼崽的雄性）性腺完好的陌生小鼠，或涂有雄性性信息素darcin（1 mg/ml，20μl）的TX陌生小鼠。(B类)在雌雄小鼠用网格隔开的竞技场中，接触雄性刺激小鼠20分钟后，离散的雌性尿液标记数。在这两个图中，显示了各个数据(n个=每组10至12只小鼠）；黑色条表示平均值±SEM*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）通过单样本Wilcoxon符号秩检验或Tukey事后比较检验，与300秒相比，<0.001。来自妊娠晚期和哺乳期小鼠的数据显示为合并数据，因为没有观察到显著差异。
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