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。2022年3月2日；63(3):14.
doi:10.1167/iovs.63.3.14。

泪腺导管阻塞后泪腺微环境的变化

新河 1 2 三, 王少攀 2 三 4, 孙惠民 2 三, 惠和 2 三, 石亚林 1, 吴一鸣 2 三, 韩武（Han Wu） 2 三, 刘祖国 2 5 三, 井仪庄 1, 魏丽 2 5 三
附属公司

泪腺导管阻塞后泪腺微环境的变化

新河等。 投资眼科视觉科学。 。

摘要

目的：探讨泪腺管阻塞后泪腺微环境的变化。

方法：用缝线结扎大鼠眶外泪腺导管，结扎时间不同。之后，松开一些动物的缝合线，并观察21天，以评估泪腺的恢复情况。采用裂隙灯和泪液分泌试验评估眼表和泪腺功能。采集泪腺和角膜进行苏木精-伊红染色、油红O染色、LipidTOX染色、Masson染色、实时定量聚合酶链反应和免疫荧光染色。

结果：泪腺导管阻塞后，泪液分泌和泪腺重量减少。7天后角膜新生血管的发生率增加。腺内导管扩张，腺泡破坏。长期结扎导致泪腺纤维化和脂质积聚。炎症细胞浸润，炎症因子上调。增殖细胞和凋亡细胞增加。肌上皮细胞和基底膜的结构被破坏。p63表达增加，而Pax6表达减少。缝合线松解后，结扎后不到7天，泪液分泌和腺泡结构即可恢复，炎症细胞浸润减少，纤维化减轻。5天后凋亡细胞和增殖细胞增加。结扎3天后，肌上皮细胞和基底膜结构无法恢复，结扎5～14天后间充质细胞数量增加。

结论：泪腺导管阻塞会导致泪腺腺泡细胞营养不良、炎症和泪腺微环境脂质积聚。长时间的泪道阻塞会导致不可逆的泪腺功能衰竭。

PubMed免责声明

利益冲突声明

披露：十、他：，无；S.Wang，无；H.Sun，无；H·何，无；石毅，无；吴彦祖，无；H.Wu，无；刘总，无；庄杰，无；李伟，无

数字

图1。
图1。
泪腺导管结扎和释放后泪液分泌和泪腺重量发生变化。(A类)图片显示了实验的模式图。结扎组于术后1、3、5、7、14和21天处死大鼠。对于释放组，在结扎后1、3、5、7、14和21天取出缝合线，并在处死前将动物保存21天。(B类)酚红线泪液分泌试验显示，结扎导管并松开缝合线后有泪液分泌。(C类)阻塞和通畅后泪腺重量在整个过程中发生变化（n=5*P（P）<0.5**P（P）< 0.01, ***P（P）< 0.001). 使用t吨-测试方法。(B、 C类)。
图2。
图2。
泪腺导管结扎和释放后AQP5和神经分布的变化。(A类)图像显示泪腺AQP5免疫荧光染色(红色：AQP5；蓝色：DAPI）。(B类)β-III微管蛋白免疫荧光染色显示泪腺神经分布(红色：β-III微管蛋白；蓝色：DAPI）。比例尺：40微米(C类)图中显示了AQP5的平均荧光强度。(D类)图中显示了β-III微管蛋白的平均荧光强度（n=5*P（P）< 0.5, **P（P）< 0.01, ***P（P）< 0.001 ****P（P）< 0.0001). 使用单向方差分析测试方法对实验进行统计分析(C、 D类)。
图3。
图3。
泪腺导管结扎和松解术后的眼部表现。(A类)角膜裂隙灯和荧光素钠染色显示阻塞后和缝线松解后的眼表改变。(B类)阻塞导管和重新打开导管后角膜新生血管的发生率。(C类)H&E染色显示中央角膜和角膜缘的表现。比例尺：100µm。(D类)PMN免疫荧光染色显示结扎组多形核白细胞增多，缝线松解后明显减少(绿色：PMN；蓝色：DAPI）。比例尺：50µm。(电子)图表显示结扎组和释放组的角膜荧光素评分（n=5****P（P）< 0.0001). 使用单向方差分析测试方法对实验进行统计分析(B、 E类)。
图4。
图4。
泪道堵塞后泪腺结构发生变化。(A类)H&E染色显示结扎组泪腺导管扩张，细胞浸润，腺泡萎缩。(B类)H&E染色显示，释放组导管扩张和腺泡萎缩在7天前有所改善。比例尺：100µm。箭头显示浸润细胞；星号表示腺管扩张（n=5）。
图5。
图5。
泪道阻塞后泪腺纤维化过程。(A类)Masson染色显示结扎组第三天开始泪腺纤维化。(B类)Masson染色显示，释放组在7天内纤维化有部分改善。箭头表明泪腺胶原纤维化。比例尺：100µm，n=5。
图6。
图6。
泪道阻塞后泪腺脂质积聚。(A类)LipidTOX染色显示，结扎组和释放组在7天后中性脂质分布增加(红色：脂毒素，蓝色：DAPI）。比例尺：40微米。(B类)油红O染色显示泪腺中性脂质积聚。比例尺：100µm，n=5。
图7。
图7。
泪道阻塞后泪腺炎症细胞浸润。(A类)PMN染色显示，结扎组泪腺组织中浸润的多形核白细胞在1天后增加，释放组在14天前减少(红色：PMN；蓝色：DAPI）。比例尺：200µm。(B类)CD68染色显示，结扎组和释放组浸润泪腺的巨噬细胞在7天后增加(绿色：CD68；蓝色：DAPI）。比例尺：200µm。(C类)图中显示了PMN染色的平均免疫荧光强度。(D类)图中显示了CD68染色的平均免疫荧光强度。(电子)qRT-PCR结果显示泪腺IL1β、TNFα、IL10和TSG6的表达（n=5*P（P）< 0.5, **P（P）< 0.01, ***P（P）< 0.001, ****P（P）<0.001）使用单向方差分析测试方法对实验进行统计分析(C、 D类)。使用t吨试验方法(电子)。
图8。
图8。
泪腺导管阻塞后泪腺细胞增殖和凋亡。(A类)TUNEL染色显示结扎组和释放组泪腺中的凋亡细胞在7天后增加(绿色：隧道；蓝色：DAPI）。比例尺：200µm。(B类)Ki67免疫荧光染色显示，结扎组和释放组泪腺中的增殖细胞在7天后增加(绿色：Ki67；蓝色：DAPI）。比例尺：200µm。(C类)图表显示了泪腺中TUNEL阳性细胞的数量。(D类)图表显示了泪腺中Ki67阳性细胞的数量（n=5****P（P）< 0.001). 使用单向方差分析测试方法对实验进行统计分析(C、 D类)。
图9。
图9。
泪腺导管阻塞后，泪腺祖细胞和基膜发生变化。(A类)图像显示泪腺中p63阳性细胞和肌上皮细胞的免疫荧光染色(绿色：αSMA；红色：第63页；蓝色：DAPI）。比例尺：200微米(B类)层粘连蛋白5免疫荧光染色显示泪腺基底膜改变(红色：层粘连蛋白5；蓝色：DAPI）。比例尺：20µm。(C类)波形蛋白免疫荧光染色显示泪腺间充质细胞在7天后增加，21天后减少(红色：波形蛋白；蓝色：DAPI）。比例尺：40微米。(D类)qRT-PCR结果显示结扎组泪腺中p63、Pax6和αSMA的表达。(电子)qRT-PCR结果显示释放组泪腺中p63、Pax6和αSMA的表达（n=5*P（P）< 0.5, **P（P）< 0.01, ***P（P）< 0.001, ****P（P）< 0.001). 使用t吨试验方法(D、 E类)。
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引用人

  • 泪液引流障碍改变了泪腺的结构和功能。
    肖乙，郭丁，刘瑞，涂美，陈Z，郑毅，刘丙，梁莉。 肖波等。 投资眼科视觉科学。2023年7月3日；64(10):13. doi:10.1167/iovs.64.10.13。 投资眼科视觉科学。2023 PMID：37440262 免费PMC文章。
  • 基质细胞蛋白SPARC在成人和炎症期间在泪腺中减少。
    Feldt J、Garriz A、Rodriguez Benavente MC、Woodward AM、Zoukhri D、Argüeso P。 Feldt J等人。 投资眼科视觉科学。2022年12月1日；63(13):8. doi:10.1167/iovs.63.13.8。 投资眼科视觉科学。2022 PMID：36479944 免费PMC文章。

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