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.2022年1月；10(2):79.
doi:10.21037/atm-21-6916。

lncRNA NEAT1下调抑制人皮肤鳞癌的增殖体内和在体外

振华宫 1, 沈国良 1, 黄春晖 1, 张建超 1, Jianfeng季 2
附属公司

lncRNA NEAT1下调抑制人皮肤鳞癌的增殖体内和在体外

振华宫等。 Ann Transl医学. 2022年1月.

摘要

背景：皮肤鳞状细胞癌（CSCC）是威胁人类生命的恶性肿瘤，其发病率逐年上升，但其发病机制尚不清楚。本研究发现长非编码RNA（lncRNA）富含细胞核的丰富转录物1（NEAT1）在CSCC中异常表达。然而，lncRNA NEAT1在致癌和癌症发展中的生化机制尚不清楚。

方法：采用荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测lncRNA NEAT1在CSCC和癌旁组织中的表达，并探讨NEAT1水平与患者临床病理特征的相关性。使用集落形成、细胞计数试剂盒-8和Transwell分析测定CSCC细胞的侵袭、增殖和迁移。Western blot分析检测NEAT1敲除是否影响侵袭和迁移相关蛋白。此外，还进行了裸鼠皮下成瘤实验，以确定NEAT1的敲除是否影响CSCC细胞的增殖能力。

结果：CSCC组织中lncRNA NEAT1表达的变化与淋巴结转移程度以及患者的肿瘤、区域淋巴结和远处转移（TNM）分级有关。NEAT1 lncRNA的下调显著阻碍了CSCC中细胞的侵袭、增殖和迁移。通过lncRNA NEAT1敲低，金属蛋白酶-2、金属蛋白酶-9、N-钙粘蛋白和波形蛋白表达显著降低，E-钙粘蛋白水平升高。裸鼠体内实验表明，lncRNA NEAT1的敲低可显著抑制CSCC中的细胞增殖。

结论：在CSCC组织中，NEAT1 lncRNA高水平表达，并与淋巴结转移和TNM分期相关。NEAT1 lncRNA的敲除可显著阻止CSCC的增殖、转移和侵袭。此外，通过检测lncRNA NEAT1的表达水平，我们可能能够检测CSCC的临床和病理特征。

关键词：皮肤鳞状细胞癌；lncRNA NEAT1；扩散。

PubMed免责声明

利益冲突声明

利益冲突：所有作者均已填写ICMJE统一披露表（可在https://atm.amegroups.com/article/view/10.2037/atm-21-6916/coif). 作者没有利益冲突需要声明。

数字

图1
图1
荧光定量PCR检测CSCC细胞株和组织中lncRNA NEAT1的表达水平。（A） LncRNA NEAT1在54对CSCC及其邻近组织中的表达；以及（B）lncRNA NEAT1在CSCC细胞系（SCC13、A431、HSC-5和SCL-1）和人类正常皮肤细胞系（HaCaT）中的表达*P<0.05与。HaCaT公司。聚合酶链反应；lncRNA，长非编码RNA；NEAT1，富含核转录物1；CSCC，皮肤鳞状细胞癌。
图2
图2
敲低lncRNA NEAT1显著抑制CSCC细胞系（A431和HSC-5）的增殖。（A） 荧光定量PCR检测shNEAT1-1和shNEAT1-2转染对CSCC细胞（A431和HSC-5）lncRNA NEAT1表达的影响；（B） MTT分析显示，lncRNA NEAT1敲除显著抑制CSCC细胞（A431和HSC-5）增殖；和（C）平板克隆形成实验表明，lncRNA NEAT1敲除显著抑制CSCC细胞（A431和HSC-5）的集落形成能力（结晶紫染色，1×）*P<0.05与。shRNA对照**P<0.01与。shRNA控制。lncRNA，长非编码RNA；NEAT1，富含核转录物1；皮肤鳞状细胞癌；聚合酶链反应。
图3
图3
Transwell分析检测了lncRNA NEAT1敲低对CSCC细胞（A431和HSC-5）迁移和侵袭的影响（结晶紫染色，100×）**P<0.01与。shRNA控制。lncRNA，长非编码RNA；NEAT1，富含核转录物1；皮肤鳞状细胞癌。
图4
图4
Western blot检测lncRNA NEAT1敲除对CSCC细胞系（A431和HSC-5）中迁移和侵袭相关蛋白表达水平的影响。lncRNA，长非编码RNA；NEAT1，富含核转录物1；皮肤鳞状细胞癌。
图5
图5
敲低lncRNA NEAT1抑制肿瘤生长体内（A）空白对照组（shNAT1-对照）和shNEAT-2组裸鼠皮下接种细胞形成肿瘤的照片；（B） 肿瘤组织测量后的肿瘤体积分析；（C） 裸鼠荷瘤组织增殖的生长曲线；（D） 28岁时肿瘤组织的湿重第个皮下接种后第天；和（E）空白对照（shNAT1对照）组和shNEAT-2组中lncRNA NEAT1表达水平的荧光定量PCR分析*P<0.05，**P<0.01。lncRNA，长非编码RNA；NEAT1，富含核转录物1；聚合酶链反应。
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