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.2022年1月；13(1):1198-1208.
doi:10.1080/21655979.2021.2018384。

紫杉醇通过Wnt/β-catenin途径抑制基质金属蛋白酶10改善人支气管上皮细胞炎症损伤

陈友华 1, 阎梅 1, 陆洋 1, 李伟斌 1, 于舟 1, 苏容河 1, 梁杰（音译） 1
附属机构

紫杉醇通过Wnt/β-catenin途径抑制基质金属蛋白酶10改善人支气管上皮细胞炎症损伤

陈友华等。 生物工程. 2022年1月.

摘要

紫杉醇（TXL），也称为二氢槲皮素，是植物界最重要的黄酮类化合物之一。越来越多的证据表明它在呼吸道疾病中起着关键作用。本研究旨在揭示TNF-α刺激的BEAS-2B细胞中TXL可能影响哮喘发展的详细机制。用MMT检测TNF-α诱导前后用TXL处理的BEAS-2B的细胞活力。采用定量逆转录PCR（RT-qPCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和Western blot检测TXL暴露于体外哮喘模型后炎性细胞因子、MUC5AC和ICAM-1的表达。然后，采用荧光素透射率、TUNEL和Western blot检测透光率和细胞凋亡。MMP10过度表达后，再次进行上述分析。最后，通过检测Wnt/β-catenin途径中的蛋白，证实了Wnt/？-catenin途径与MMP10之间的关联。TXL增加TNF诱导的BEAS-2B细胞的细胞活力。TXL抑制TNF-α诱导的BEAS-2B细胞的炎症、粘液形成和凋亡。此外，在预测TXL和MMP10之间的结合位点后，发现MMP10的过度表达逆转了TXL抑制TNF-α诱导的BEAS-2B细胞进展的作用。最后，TXL通过抑制MMP10的表达来阻断Wnt/β-catenin通路。TXL通过阻断Wnt/β-catenin通路抑制MMP10的表达，是一种很有前途的治疗哮喘的药物。未来对这种常用生物活性黄酮进行的哮喘体内实验研究可能为哮喘的治疗开辟新的途径。

关键词：MMP10；紫杉醇；Wnt/β-catenin途径；肿瘤坏死因子-α诱导的气道炎症。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人没有报告任何潜在的利益冲突。

数字

图1。
图1。
Taxifolin对人支气管上皮细胞的细胞活力没有显著影响。（a） TXL的化学结构。（b） TXL处理下BEAS-2B细胞的活性。数据以平均值±标准差（SD）表示。这个实验重复了四次***P<0.001与控制。#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001与TNF-α。
图2。
图2。
紫杉醇抑制TNF-α诱导的人支气管上皮细胞的炎症和粘液形成。（a） TXL处理下TNF-α诱导的BEAS-2B细胞的细胞活力。（b-c）TXL处理TNF-α诱导的BEAS-2B细胞中IL-6、IL-8和MCP-1的表达。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。#P<0.05,### P<0.001与TNF-α。
图3。
图3。
紫杉醇阻断TNF-α诱导的人支气管上皮细胞粘液的形成。TXL暴露后TNF-α诱导的BEAS-2B细胞中MUC5AC和ICAM-1的表达。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。#P<0.05时，## P<0.01,### P<0.001与TNF-α。
图4。
图4。
紫杉醇阻断TNF-α诱导的人支气管上皮细胞的细胞屏障损伤和凋亡。（a） TXL暴露后TNF-α诱导的BEAS-2B细胞的透光率和（b-c）凋亡。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。##P<0.01,###P<0.001与TNF-α。
图5。
图5。
紫杉醇抑制TNF-α诱导的人支气管上皮细胞凋亡。TXL暴露后TNF-α诱导的BEAS-2B细胞凋亡相关蛋白水平。
图6。
图6。
紫杉醇抑制TNF-α诱导的人支气管上皮细胞中MMP10的表达。（a） TXL靶蛋白的SwissTargetPrediction结果。（b） TXL暴露后TNF-α诱导的BEAS-2B细胞中MMP10的表达。数据以平均值±标准差（SD）表示。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。#P<0.05,## P<0.01,### P<0.001与TNF-α。
图7。
图7。
紫杉醇通过抑制MMP10的表达来阻断TNF-α诱导的人支气管上皮细胞的炎症反应。（a） 用50μM TXL和Oe-MMP10处理TNF-α诱导的BEAS-2B细胞，构建Oe-MMP10后MMP10的表达。（b-c）经TXL和Oe-MMP10处理的TNF-α诱导的BEAS-2B细胞中IL-6、IL-8和MCP-1的表达。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。### P<0.001与TNF-α。ΔP（P）<0.05,ΔΔP（P）<0.01,ΔΔΔP（P）<0.001 vs TXL+TNF-α+Oe-NC。
图8。
图8。
紫杉醇通过抑制MMP10的表达，阻断TNF-α诱导的BEAS-2B细胞粘液的形成。用50μM TXL和Oe-MMP10处理TNF-α诱导的BEAS-2B细胞，观察MUC5AC和ICAM-1的表达。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。###P<0.001与TNF-α。ΔΔP（P）<0.01,ΔΔΔP（P）<0.001 vs TXL+TNF-α+Oe-NC。
图9。
图9。
Taxifolin通过抑制MMP10的表达，阻断TNF-α诱导的人支气管上皮细胞的凋亡和细胞屏障损伤。（a） 用50μM TXL和Oe-MMP10处理TNF-α诱导的BEAS-2B细胞的透光率和（b）凋亡。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。###P<0.001与TNF-α。ΔΔΔP（P）<0.001 vs TXL+TNF-α+Oe-NC。
图10。
图10。
紫杉醇通过抑制MMP10的表达阻断Wnt/β-catenin通路。（a） 凋亡相关蛋白的水平，（b）经50μM TXL和Oe-MMP10处理的TNF-α诱导的BEAS-2B细胞中p-GSK3b和b-catenin的表达。数据表示为平均值±标准偏差（SD）。每个实验至少重复三次***P<0.001与控制。###P<0.001与TNF-α。ΔP（P）<0.05,ΔΔP（P）<0.01,ΔΔΔP（P）<0.001 vs TXL+TNF-α+Oe-NC。
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