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。2021年2月26日14:1487-1499。
doi:10.2147/OTT。S288847。 eCollection 2021年。

FAST1预测肾癌生存率低下并通过TGF-β/Smad途径促进其进展

陶田 1, 襄阳付 2, 胡良良 1, 杨晓峰 1, 孙鹏（音译） 1, 孙凤凤 1
附属公司

FAST1预测肾癌生存率低下并通过TGF-β/Smad途径促进其进展

陶田等。 Onco目标Ther。 。

摘要

目的：肾癌起源于肾小管上皮系统，其中肾细胞癌最常见。叉头激活素信号转导子1（FAST1）已被证明作为癌基因干扰肿瘤进展，而其在RC中的作用有限。因此，本文探讨了FAST1对RC的预后意义、特异性作用及相关机制。

患者和方法：细胞集落形成实验、细胞计数kit-8（CCK8）实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测细胞增殖、活力、凋亡、迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法（WB）测定FAST1的蛋白水平。

结果：我们的研究证实，FAST1在RC组织和细胞系中上调，其过度表达通常表示RC患者预后不良。同时，体外实验表明，过表达FAST1促进了RC细胞的存活、增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化（EMT），并抑制了细胞凋亡。此外，体内实验表明，FAST1的上调增强了肿瘤的生长。相反，击倒FAST1具有相反的效果。从机制上讲，TGF-β/Smad通路有助于RC的演变，并在体内外被FAST1激活。

结论：本文提示FAST1通过调节TGF-β/Smad信号通路在RC中发挥致癌作用。

关键词：TGF-β/Smad通路；叉头激活素信号转换器1；肾癌。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者报告说，在这项工作中没有利益冲突。

数字

图1
图1
FAST1在RC组织中表达上调。采集RC组织和成对癌旁组织，并将其储存在−80°C液氮中。(A类和B类)采用QRT-PCR和WB检测FAST1在RC组织和邻近正常组织中的表达***P（P）<0.001（与正常组相比）；(C类)通过KM绘图仪分析RCC患者的生存率。(D类)GEPIA公司(http://gepia.cancer-pku.cn/)用以查询FAST1在KIRC中的表达及生存预后。
图2
图2
FAST1过表达加重了RC的恶性生物学行为，抑制了细胞凋亡。用FAST1过表达质粒转染769-P细胞系。(A类)通过qRT-PCR验证FAST1的表达。(B类)细胞集落形成试验用于检测细胞活力。(C类)CCK8用于检测细胞增殖。(D类)流式细胞术检测细胞凋亡。(E类和F类)Transwell实验证实细胞迁移和侵袭。(G公司)WB检测EMT相关标记物（E-cadherin、Claudin1、N-cadherin和蜗牛）的表达*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001（与NC组相比）。N=5。
图3
图3
敲除FAST1可减轻RC细胞的恶性生物学行为。ACHN细胞系转染sh-FAST1和阴性对照（sh-NC）。(A类)用qRT-PCR检测FAST1的表达。(B类——F类)分别用集落形成法、CCK8、流式细胞术和Transwell法检测细胞活力、凋亡、增殖、迁移和侵袭。(G公司)WB监测E-cadherin、Claudin1、N-cadherin和蜗牛的水平*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001（与Si-NC组相比）。N＝5。
图4
图4
FAST1在体内促进RC细胞的生长。将稳定转染FAST1过表达质粒的769-P细胞系皮下注射到实验裸鼠体内。(A类——C类)记录肿瘤大小，测量肿瘤重量，绘制生长曲线和重量直方图。(D类和E类)IHC检测肿瘤组织中FAST1和E-cadherin的表达。(F类)采用WB检测肿瘤组织中E-cadherin、Claudin1、N-cadherin和蜗牛的表达*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001（与NC组相比）。N=5。
图5
图5
FAST1激活TGF-β/Smad。稳定转染过表达FAST1的789-P细胞系，稳定转染FAST1敲除的ACHN细胞系，以及通过裸鼠肿瘤形成实验获得的小鼠肿瘤。(A类——C类)WB检测TGF-β和p-Smad2/Smad2在789-p、ACHN细胞或体内肿瘤组织中的表达。(D类)IHC检测肿瘤组织中p-Smad2的表达。(E类)字符串(https://string-db.org/cgi/input.pl)显示了FAST1的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络。(F类)通过STRING预测FAST1的下游蛋白途径(https://string-db.org/cgi/input.pl)TGF-β信号通路是FAST1潜在的通路。(G公司)共免疫沉淀用于确认FAST1和Smad2在789-P细胞中的相互作用**P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001（与NC组相比）*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01, ***P（P）<0.001（与Si-NC组相比）。N=5。
图6
图6
抑制TGF-β可减弱FAST1过度表达诱导的RC细胞的恶性生物学行为。用FAST1过表达质粒转染789-P细胞系，并添加TGF-β抑制剂（RepSox，2µmol/L）。(A类)用qRT-PCR检测FAST1的表达。(B类——F类)采用细胞集落形成试验、CCK8、流式细胞术和Transwell试验监测两组细胞的活力、凋亡、增殖、迁移和侵袭**P（P）与载体组相比<0.01，&P<0.05，&&与FAST1组相比P<0.01。N=3。(G公司和H（H）)WB用于比较EMT相关标记物和TGF-β/Smad2通路的表达。(我)用TGF-β（10 ng/mL）处理789-P细胞24小时，然后进行WB检测Smad2和FAST1水平*P（P）<0.05, **P（P）<0.01, ***P（P）< 0.001. N=3。
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引用人

  • 肾细胞癌中的炎症网络。
    Kruk L、Mamtimin M、Braun A、Anders HJ、Andrassy J、Gudermann T、Mammadova-Bach E。 Kruk L等人。 癌症（巴塞尔）。2023年4月9日；15(8):2212. doi:10.3390/cancers15082212。 癌症（巴塞尔）。2023 PMID：37190141 免费PMC文章。 审查。

工具书类

    1. 王AB，鲍毅，吴志杰，等。长非编码RNA EGFR-AS1通过影响HuR介导的EGFR mRNA稳定性促进肾癌细胞生长和转移。细胞死亡疾病。2019年；10(3):154. doi:10.1038/s41419-019-1331-9-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 刘晓波，郝玉霞，于伟，等。肾细胞癌发生过程中长非编码RNA的出现。细胞生理生化。2018;47(2):735–746. 数字对象标识代码：10.1159/000490026-内政部-公共医学
    1. Wang L，Su Y，Huang C，et al.FOXH1由NANOG和LIN28调节，用于早期重编程。2019年科学报告；9(1):16443. doi:10.1038/s41598-019-52861-8-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Roessler E、Ouspenskaia MV、Karkera JD等。通过包括FOXH1在内的几个通路成员的突变降低NODAL信号强度，与人类心脏缺陷和无前脑畸形有关。美国人类遗传学杂志。2008;83(1):18–29. doi:10.1016/j.ajhg.2008.05.012-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 程Q，史玉杰，李Z，康H，向Z，孔LF。FAST1促进结直肠癌细胞的迁移和侵袭。生物化学与生物物理研究委员会。2019年；509(2):407–413. doi:10.1016/j.brc.2018.12.122-内政部-公共医学

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