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.2020年3月;52(1):e102。
doi:10.1002/cpsc.102。

人诱导多能干细胞TP53表达的有效调控

附属公司

人诱导多能干细胞TP53表达的有效调控

康斯坦斯·乌尔曼等。 Curr原代干细胞生物学. 2020年3月.

摘要

TP53点突变在所有癌症中占50%,似乎在癌症发病机制中起着重要作用。因此,过度表达突变型TP53的人诱导多能干细胞(hiPSCs)是建立肿瘤干细胞体外模型或体内异种移植模型的重要工具。在此,我们描述了一种使用慢病毒转导通过过度表达TP53(R249S)基因的突变形式来改变hiPSC中基因表达的方案。转导和抗生素筛选后1周检测到大量TP53蛋白。通过对转导的hiPSC进行分化,可以更好地了解不同组织中的癌症形成,并可能成为基因或药物筛选分析的有用工具。©2019作者。基本方案1:第三代慢病毒的生产和浓缩支持方案1:将感兴趣的基因克隆到调制载体支持方案2:用10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素制备DMEM-GlutaMAX™基本方案2:转导人诱导多能干细胞和选择阳性转染细胞支持方案3:基质的制备®-涂层板支持方案4:mTeSR™1培养基的制备。

关键词:TP53;hiPSC;慢病毒转导;分子改变。

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