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图2

图2来源:转录因子SIX5在分支-肾综合征患者中发生突变。

中的突变SIX5系列影响SIK5-Eya1的结合。进行酵母双杂交试验以测试突变对SIX5与Eya1结合能力的影响。GAL4BD-SIX5和GAL4AD-Eya1D的共同转化导致lacZ公司表达式。减少2倍以上LacZ公司当含有A158T或T552M突变的SIX5蛋白与Eya1D融合蛋白共同转化时,可以看到其表达。

Bethan E.Hoskins等人,《美国人类遗传学杂志》。2007年4月;80(4):800-804.
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图1

图1.来源:转录因子SIX5在分支-肾综合征患者中发生突变。

四种错义突变SIX5系列在BOR患者中发现。A、,A158T、A296T和G365R突变,以杂合子形式存在于单个患者中。在A465和A500患者中检测到T552M突变。受影响个体的序列如健康对照个体的序列所示。患者标识符、核苷酸变化和氨基酸变化显示在痕迹上方。B、,SIX5在N末端具有SIX家族蛋白质的SD和同源域(HD)特征。激活域也被映射到C末端。A158T突变位于SIX结构域;其余三个突变位于HD和激活域之间。

Bethan E.Hoskins等人,《美国人类遗传学杂志》。2007年4月;80(4):800-804.
三。
图3

图3.From:Branchio-Oto-Renal综合征患者的转录因子SI65突变。

中的突变SIX5系列降低其激活MEF3启动子转录的能力。肌球蛋白荧光素酶报告基因pGL3-6×MEF3与含有SIX5或其突变体(A158T、A296T、G365R和T552M)、pFlag-Eya1或SIX5和Eya1质粒的pcDNA3载体在HEK293细胞中共同转染。细胞裂解液中的荧光素酶活性以pCMVβ-gal的β-半乳糖苷酶活性作为内部对照进行标准化。每个数据点的活性与控制pCMV载体获得的活性相关。三个独立实验(每个实验重复进行)的平均折叠激活值显示为标准偏差。实心圆圈(•)表示<.002,与SIX5相比;星号(*)表示<0.002,与SIX5/Eya1相比(单向方差分析[ANOVA])。

Bethan E.Hoskins等人,Am J Hum Genet。2007年4月;80(4):800-804.

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