缺氧对nNOS前导外显子翻译的影响。(A类)单顺反子荧光素酶报告子结构的设计。不同的人类无操作系统5′-UTR序列位于荧光素酶ORF上游。(B类)变化的影响无操作系统先导序列对报告RNA翻译效率的影响。体外-转录、加盖、，无操作系统5′-UTR/荧光素酶报告RNA在兔网织红细胞裂解物中瞬时翻译或瞬时转染到培养的C2C12心肌细胞。数据表示为三个独立实验的平均值±SEM，每个实验一式三份*P（P）与Ex2-Long（Ex2-L）值的差异<0.05。Ex2-S，Ex2-Short；Vct，仅矢量。(C类)研究评估了常氧（白条）和缺氧（5小时；黑条）对瞬时转染含有无操作系统Ex-1c、Ex2-Short和Ex2-Long先导序列。图中所示为三个独立实验的平均值±SEM，每个实验一式三份。(D类)双顺反子荧光素酶报告子结构的设计。不同的人类无操作系统将5′-UTR序列插入多克隆位点（MCS）雷尼利亚和萤火虫荧光素酶ORF。pRhrvF和pRpolioF分别含有人鼻病毒IRES成分和脊髓灰质炎病毒IRES元素，作为IRES活性的阳性对照。(E类)萤火虫与雷尼利亚荧光素酶活性（FL/RL）相对于缺乏任何无操作系统正常氧（白条）和缺氧（5小时；黑条）条件下的5′-UTR序列（pRF）。研究评估了用双顺反子RNA构建体瞬时转染的培养的肌细胞（C2C12细胞）中的报告基因活性。数据表示为三个独立实验的平均值±SEM，每个实验一式三份。