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图2

图2。来源:VLGR1基因突变在II型亚瑟综合征发病机制中暗示G蛋白信号传导。

VLGR1/MASS1亚型的结构域。VLGR1b mRNA的概念翻译揭示了一种蛋白质,该蛋白质具有35个Calx-β结构域、1个LamG/TspN/PTX同源结构域(Beckmann等人)、7个EAR/EPTP重复序列,形成一个假定的β螺旋桨折叠结构域(Scheel等人;Staub等人)、一个GPS、一个B族7TM结构域、,具有多个潜在丝氨酸磷酸化位点的假定细胞内尾部,以及假定PDZ结合COOH末端(McMillan等人)。VLGR1的PTX域和美国H2A蛋白质引导子彼此最相似,BLASTP评分为2e-09。人类USH2C的位置(黄色的)发热性眩晕(FS;灰色)–相关突变出现在VLGR1a、VLGR1b和VLGR1c亚型上。小鼠听源性反射性癫痫模型弗林斯和与年龄相关的听力损失模型BUB/BnJ都是V2250FS突变的纯合子,并且在Mass1.1、Mass1.2和Mass1.3亚型上都有发现(Skradski等人)。

Michael D.Weston等人,Am J Hum Genet。2004年2月;74(2):357-366.
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图1

图1。来源:VLGR1基因突变与Usher综合征II型发病机制中的G蛋白信号转导有关。

隔离VLGR1型735、964和1848家族中的Q2301X、M2931FS、I2906FS和T6244X突变(USH2C)。A、,外显子31 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳显示1848家系Q2301X的父系遗传Xmn公司我消化。Q2301X突变是一个6901 C→T转换,位于交替外显子31剪接供体的3′端33 bp,仅影响VLGR1b mRNA亚型()。这里显示的是杂合子家族1848先证者(HET)、明显的Q2301X纯合子和野生型(WT)BAC克隆RP11-29K14的序列电泳图,具有序列和氨基酸翻译差异(箭头). Q2301X纯合子是兄弟姐妹乱伦结合的结果,而另一例独生子女是Q2301X/隐性杂合子(数据未显示;)。B、,外显子39 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳显示964家系M2931FS的母亲遗传Nco公司我消化。WT和克隆的M2931FS等位基因的序列电泳图显示,第39外显子为8790delC(箭头). 这种缺失导致10密码子移码。以外显子39的最后3个碱基编码的TAG停止结束,影响VLGR1b。C、,通过外显子38 PCR产物的DHPLC对1848家系I2906FS的母亲遗传。克隆的I2906FS突变的序列比较显示8716–17insAACA(箭头)导致5个密码子的移码,并在第38外显子3′端短1 bp的TGA终止,影响VLGR1b。D、,通过外显子89 PCR产物的DHPLC检测Y6244X的父系遗传。19bp的缺失使TAG终止密码子立即进入框架。Y6244X从VLGR1a和VLGR1b的COOH端去除63个氨基酸。735家系和964家系中推定的母系和父系突变尚未确定。

Michael D.Weston等人,《美国人类遗传学杂志》。2004年2月;74(2):357-366.
三。
图3

图3。来源:VLGR1基因突变与Usher综合征II型发病机制中的G蛋白信号转导有关。

人和小鼠胎儿组织VLGR1 mRNA剪接形式的RT-PCR。人类胎儿组织从左到右依次为:眼(Ey)、耳蜗(Co)、脑(Br)、肾(Ki)、结肠(Cl)、胃(St)、肺(Lu)、肝(Li)、脊髓(Cr)、肌肉(Mu)、舌(to)和成人胎盘(Pl)。A、,人类Q2301X和周五和BUB/BnJ小鼠V2250FS突变到区分VLGR1b和VLGR1c剪接异构体的替代供体位点。由于外显子31中5′剪接单体位点的替代使用,这些亚型的差异达83 bp(Skradski等人;McMillan等人)。30个RT-PCR周期时,眼睛和耳蜗组织的表达强度低于大脑和脊髓。在40个周期时,除肝脏和胎盘外,所有组织的VLGR1表达与VLGR1b的相对强度相似(数据未显示)。B、,VLGR1a 5′起始位点相对于VLGR1b外显子65 3′剪接受体的位置。VLGR1a和VLGR1b剪接形式30个周期的RT-PCR结果显示,与中的组织分布相似,并且相对强度相似。所有RNA均为D-甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)阳性(数据未显示)。C、,人类和小鼠中VLGRb和VLGR1c浓度的比较显示,这些亚型的相对丰度存在物种特异性差异,这些亚型别是从胎脑mRNA扩增而来的,表明不同物种间备用外显子31供体位点的使用存在差异。

Michael D.Weston等人,《美国人类遗传学杂志》。2004年2月;74(2):357-366.

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