跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2022年10月21日；5(1):1118.
doi:10.1038/s42003-02-04087-0。

光滑念珠菌临床分离株抗唑基因进化揭示了CgHxt4/6/7在唑累积中的重要性

莫尼卡·加洛查 1 2 三, 罗梅·维亚纳 1 2 三, 佩德罗·佩斯 1 2 三, 安娜·席尔瓦·迪亚斯 4 5, 马法尔达·卡瓦莱罗 1 2 三, 伊莎贝尔·M·米兰达 4 5 6, 梅克·范·恩德 7 8, Caio S Souza公司 9, 卡塔琳娜·科斯塔 1 2 三, 乔安娜·布兰科 4 5, Cláudio M Soares公司 9, 帕特里克·范·迪克 7 8, Acácio G Rodrigues公司 10 11, 米格尔·C·特谢拉 12 13 14
附属公司

光滑念珠菌临床分离株对唑耐药性的基因组进化揭示了CgHxt4/6/7在唑积累中的重要性

莫尼卡·加洛查等。 公共生物. .

摘要

光滑念珠菌引起的念珠菌病的日益流行与其获得唑类耐药性的能力有关。虽然唑类药物的耐药机制众所周知，但唑类药物进入真菌细胞的机制仍不清楚。在这项工作中，我们对光滑梭菌中的两种己糖转运蛋白进行了表征，并进一步研究了它们作为潜在的唑类进口商的作用。三株对唑类药物敏感的光滑梭菌临床分离株进化为唑类药物耐药，获得的耐药表型与CgPDR1或CgERG11突变无关。通过全基因组测序，与易感亲本相比，发现三个进化菌株中的CgHXT4/6/7发生突变。CgHxt4/6/7和96%相同的CgHx16/7被发现具有唑类药物敏感性，并增加了光合作用C.glabata细胞中唑类药物的积累，显著挽救了CgPDR1缺失引起的敏感性表型，而CgHxt4/6/7中已鉴定的失能突变导致唑类药物耐药性增加。电子对接分析表明，偶氮唑类化合物对CgHxt4/6/7的葡萄糖结合位点具有很强的预测亲和力。总之，我们假设己糖转运蛋白，如CgHxt4/6/7和CgHx16/7，可能构成唑类导入剂家族，参与真菌病原体的临床耐药性，并构成改进抗真菌治疗的有希望的靶点。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1。CgHxt4/6/7和CgHx16/7是质膜己糖转运蛋白。
一指数相荧光BY4741酿酒酵母含有质粒pGREG576_TEF的细胞_CgHXT4/6/7（CgHxt4/6/7_GFP）或pGREG576_TEF_CgHXT6/7号（CgHxt6/7_GFP）和KUE100:：URA-光滑梭菌含有质粒pGREG576_PDC1的细胞_CgHXT4/6/7（CgHxt4/6/7_GFP）或pGREG576_PDC1_CgHXT6/7号（CgHxt6/7_GFP）。b条EBY斑点生长分析的比较。大众4000(Schxt公司0)含有pGREG567_TEF载体或pGREG576_TEF的菌株_CgHXT4/6/7或pGREG576_TEF_CgHXT6/7型表达质粒存在不同的指示己糖作为碳源。接种物的制备如方法部分所述。用于制备斑点的细胞悬液是（a）中所用细胞悬液的1:5（b）和1:25（c）稀释液。显示的图像代表了至少三个独立的实验。
图2
图2。CgHxt4/6/7和CgHx16/7促进了患者对唑类药物的敏感性光滑梭菌.
一抗真菌唑类药物在指定浓度下的敏感性比较光滑梭菌KEU100野生型菌株或衍生KUE100_Δcghxt4/6/7，KUE100_Δcghxt6/7码或KUE100_Δcghxt4/6/7Δcghxt6/7码YPD琼脂平板上的突变细胞斑点试验。接种物的制备如方法部分所述。用于制备斑点的细胞悬液相当于（a）中所用细胞悬液的1:5（b）和1:25（c）稀释液。显示的图像代表了至少三个独立的实验。b条时程累积率[三H] -氟康唑在非适应性KUE100野生型细胞（黑圈）或衍生KUE100_Δ中cghxt4/6/7突变细胞（灰色方块）在液体YPD培养基中与未标记的氟康唑培养。累积比率值至少为，n个 = 3个独立实验。误差条表示相应的标准偏差。显著性水平如下：*对值<0.05**对值<0.01***对值<0.001。
图3
图3。HXT公司基因在酵母对唑类抗真菌药物的敏感性中起作用。
CEN在指定浓度下对唑类药物敏感性的比较。PK2-1C型酿酒酵母野生型菌株和衍生EBY。大众4000(Schxt公司0)通过斑点试验在YPM琼脂平板上进行菌株筛选。接种物的制备如方法部分所述。用于制备斑点的细胞悬液相当于（a）中所用细胞悬液的1:5（b）和1:25（c）稀释液。显示的图像代表了至少三个独立的实验。
图4
图4。CgHxt4/6/7促进患者对唑类药物的敏感性光滑梭菌040株临床分离株，通过调节azoles的摄取。
一抗真菌唑类药物在指定浓度下的敏感性比较光滑梭菌040临床分离物，衍生突变株040Δcghxt4/6/7通过斑点试验，在YPD琼脂平板上进化出抗性菌株040_Psc。接种物的制备如方法部分所述。用于制备斑点的细胞悬液相当于（a）中所用细胞悬液的1:5（b）和1:25（c）稀释液。显示的图像代表了至少三个独立的实验。b条时程累积率[三H] -氟康唑非适应（黑圈）040或衍生（灰色方块）040_Δcghxt4/6/7在未标记的氟康唑存在下在液体YPD培养基中培养的突变细胞。累积比率值至少为，n个 = 3个独立实验。误差条表示相应的标准偏差。显著性水平如下：*对值<0.05**对值<0.01。c（c）抗真菌唑类药物在指定浓度下的敏感性比较光滑梭菌KUE100:：URA-_Δcghxt4/6/7携带pGREG576_PDC1的突变菌株_CgHXT4/6/7或pGREG576_PDC1_mut_CgHXT6/7号在BM琼脂平板上（不含尿嘧啶，用于质粒维持）。接种物的制备如方法部分所述。用于制备斑点的细胞悬液是（a）中所用细胞悬液的1:5（b）和1:25（c）稀释液。显示的图像代表了至少三个独立的实验。
图5
图5。删除其中一项CgHXT4/6/7或CgHXT6/7号在∆中cgpdr1背景挽救了CgPdr1缺失导致的唑类药物易感表型。
一KUE100在指定浓度下对抗真菌唑类药物敏感性的比较光滑梭菌野生型菌株和衍生突变菌株KUE100_Δcgpdr1，KUE100_Δcgpdr1基因Δcghxt4/6/7和KUE100_Δcgpdr1Δcghxt6/7码在YPD琼脂平板上进行斑点试验。接种物的制备如“方法”一节所述。用于制备斑点的细胞悬液相当于（a）中所用细胞悬液的1:5（b）和1:25（c）稀释液。显示的图像至少代表了，n个 = 3个独立实验。b条的增长曲线比较光滑梭菌野生型菌株KUE100和衍生突变菌株KUE100_Δcgpdr1，KUE100_Δcgpdr1基因Δcghxt4/6/7和KUE100_Δcgpdr1Δcghxt6/7码在液体YPD中，在没有或存在4 mg/L泊沙康唑的情况下，根据OD变化测量600。显示的增长曲线至少具有代表性，n个 = 3个独立实验。误差条表示相应的标准偏差。显著性水平如下：****对值<0.0001。
图6
图6。氟康唑对CgHxt4/6/7的葡萄糖结合位点具有很强的预测亲和力。
一最佳DOPE评分模型与模板的重叠大肠杆菌XylE（PDB ID 4GBZ）（粉红色）。与模板不同的循环区域以绿色表示。b条氟康唑在模型CgHxt4/6/7结构上对接，最佳姿势。c（c）D-葡萄糖对接在建模的CgHxt4/6/7结构上，最佳姿势。使用PyMOL2.5绘制图形。
请参阅PMC中的此图片和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

工具书类

    1. Brown GD等人，《隐藏的杀手：人类真菌感染》。科学。Transl.公司。2012年医学；4:165伏13。-公共医学
    1. 科伦坡AL、朱尼尔JNDA、几内亚J.新出现的耐多药念珠菌。货币。操作。感染。数字化信息系统。2017;30:528–538.-公共医学
    1. Tsai H-F、Krol AA、Sarti KE、Bennett JE。光滑念珠菌PDR1是多效性耐药网络的转录调控因子，在临床分离株和小突变株中介导唑类耐药。抗微生物。代理Chemother。2006;50:1384–92.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Vermitsky J-P等人。Pdr1调节光滑念珠菌的多药耐药性：基因破坏和全基因组表达研究。摩尔微生物。2006;61:704–722.-公共医学
    1. Caudle KE等。光滑念珠菌Pdr1调节子的全基因组表达谱分析。真核生物。单元格。2011;10:373–83.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型