X射线诱导多铜氧化酶的催化活性位还原:质子中继机制和O2还原状态的结构观察。
公共医学 : 26627648 内政部: https://doi.org/10.107/S1399004715018714 相关结构的主要引文: 2XU9型 , 2个UW , 第26页 , 2年 , 2年 , 2是的 , 2年 , 2号机组 , 2年 , 2年 , 2年 , 4AI7公司 PubMed摘要: 在从多铜氧化酶(MCO)晶体收集X射线数据的过程中,电子和质子主要通过水分子的辐解释放到系统中,导致X射线在酶的三核铜簇(TNC)处将O2还原为2H2O。 在这项工作中,测定了嗜热Thermus thermophilus HB27多铜氧化酶(Tth-MCO)在全息、载脂蛋白和汞结合形式以及不同X射线吸收剂量下的12种晶体结构。 在具有四个Cu原子的完整Tth-MCO结构中,参与O2还原的质子供体残基Glu451以双重构象存在:Glu451a(TNC中的~7º)和Glu45lb(TNC的~4.5º)。 Glu451a O(ℇ2)的Fo-Fc图中电子密度高于3.5σ的正峰表明侧链上存在羧基官能团,而其在Glu451 b中的显著缺失强烈表明存在羧酸官能团。 相反,对于apo-Tth MCO和Hg结合结构,既没有观察到正峰,也没有观察到双重构象。 总之,这些观察结果为MCO家族中的质子中继机制提供了第一个结构证据,也支持了之前的研究,这些研究表明Asp106不为该机制提供质子。 此外,具有不同X射线吸收剂量的八种复合结构(Tth-MCO-C1-8)允许观察不同的O2还原状态,并且在剂量高于0.2时T2Cu的总消耗量 MGy显示了该铜原子对辐射损伤的高度敏感性,强调了在MCO结构的生化解释中考虑辐射效应的重要性。