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.1998年11月27日;273(48):31751-8.
doi:10.1074/jbc.273.48.31751。

3T3-L1脂肪细胞分化中pref-1基因的转录控制。微分相关抑制的顺序要求

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pref-1基因在3T3-L1脂肪细胞分化中的转录控制。微分相关抑制的顺序要求

C M Smas公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

前脂肪细胞因子-1(Pref-1)是一种跨膜表皮生长因子样结构域蛋白,在3T3-L1前脂肪细胞中高度表达,但在成熟脂肪细胞中检测不到;这种下调是脂肪细胞分化所必需的。我们在此表明,在脂肪转化过程中,pref-1转录被显著抑制,导致pref-1 RNA水平降低。使用稳定转染Pref-1 5'-缺失结构体的3T3-L1细胞,该结构体在-6000、-2100、-1300、-692、-300、-235、-193、-183、-170、-93和-45碱基对处截短,我们确定-183到-170区域负责脂肪生成过程中Pref-1基因的抑制。这与前脂肪细胞中对pref-1启动子活性重要的-93到-45序列不同。将含有假定SAD(脂肪细胞分化抑制)元件的40-碱基对-193至-154 pref-1序列放置在SV40启动子上游,脂肪细胞分化时启动子活性降低了85%,而仅SV40启动子时,启动子活性下降了40%。因此,SAD元件对于异源启动子的脂肪细胞分化依赖性下调是足够的。将-193至-174序列与3T3-L1核提取物用于凝胶迁移率变化分析时,观察到DNA蛋白复合物。与含有碱基取代突变的寡核苷酸竞争,确定-183AAAGA-179的核心序列对DNA蛋白复合物的形成至关重要。紫外线交联预测,大约63-kDa的蛋白质特异性结合SAD元件。

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