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.1998年7月15日;333(第二部分):285-90。
doi:10.1042/bj3330285。

大鼠肾线粒体重构活性谷氨酰胺载体的鉴定和纯化

附属公司

大鼠肾线粒体重构活性谷氨酰胺载体的鉴定和纯化

C独立等。 生物化学杂志. .

摘要

用Celite色谱法鉴定并完全纯化了大鼠肾线粒体中的谷氨酰胺载体,该载体溶于十二烷基八氧基乙醚(C12E8)并在羟基磷灰石上部分纯化。在SDS/PAGE上,纯化的谷氨酰胺载体由一条表观分子量为41.5kDa的蛋白带组成。当重组成脂质体时,谷氨酰胺载体催化了谷氨酰胺的单向流动和谷氨酰胺/谷氨酰胺的反转运,而谷氨酰胺/麸胺的反转运可被5’-磷酸吡哆醛和N-乙基马来酰亚胺的混合物完全抑制。与线粒体提取物相比,载体蛋白纯化了474倍,回收率为58%,蛋白质产率为0.12%。谷氨酰胺载体介导的转运对左旋谷氨酰胺是相当特异的。左旋天门冬氨酸是唯一能被重组载体蛋白有效转运的其他氨基酸。d-谷氨酰胺、l-谷氨酸和l-天冬氨酸是非常差的底物。几种巯基和氨基试剂抑制了转运活性。

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引用人

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