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.1998年7月10日;280(2):245-58.
doi:10.1006/jmbi.1998.1863。

通过部分未折叠纤维连接蛋白III型模块的自结合形成淀粉样纤维

附属公司

通过部分未折叠纤维连接蛋白III型模块的自结合形成淀粉样纤维

S V利特维诺维奇等。 分子生物学杂志. .

摘要

小鼠纤维连接蛋白第九类III模块在大肠杆菌中表达,并折叠成紧凑的均匀单体,然后通过荧光、圆二色性、量热法和电子显微镜对其展开和折叠进行研究。隔离模块在生理条件下异常不稳定。当以1摄氏度/分钟的温度加热时,根据蛋白质浓度的不同,它会在35到42摄氏度之间发生不可逆的吸热转变。这种转变伴随着二级和三级结构的变化,单个色氨酸部分暴露,疏水性探针1,8-苯胺萘磺酸盐的结合增加。部分展开的中间体经历快速自结合,导致形成大的稳定多聚体,与原始单体一样,多聚体包含大量的β-片状结构。多聚体在60到90℃之间的第二次吸热转变中可逆地熔化和解离,这也取决于蛋白质浓度。第二个转变破坏了剩余的二级结构,进一步暴露色氨酸。电镜下负染标本的可视化显示,部分未折叠的rmIII-9缓慢形成约10 nm宽、长度不定的淀粉样纤维。提出了一种子域交换机制,其中一个部分未折叠分子的β链与另一个分子的互补区域相互作用,形成低聚物和聚合物。讨论了类似的相互作用可能在体内纤维连接蛋白形成纤维中发挥作用的可能性。

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