Interleukin (IL)-1 receptor-associated kinase (IRAK) requirement for optimal induction of multiple IL-1 signaling pathways and IL-6 production

doi:10.1084/jem.187.12.2073

.1998年6月15日；187(12):2073-9.

doi:10.1084/jem.187.12.2073。

白细胞介素（IL）-1受体相关激酶（IRAK）对多种IL-1信号通路和IL-6产生的最佳诱导需求

P Kanakaraj先生¹, P H谢弗, D E Cavender公司, 吴彦祖, K Ngo公司, P F润滑油, S A华兹华斯, P A彼得森, J J西基尔卡, C A哈里斯, W P丰隆

附属公司

PMID： 9625767
预防性维修识别码： PMC2212370型
内政部： 10.1084/jem.187.12.2073

白细胞介素（IL）-1受体相关激酶（IRAK）对多种IL-1信号通路和IL-6产生的最佳诱导需求

P卡纳卡拉杰等。实验医学杂志. 1998.

.1998年6月15日；187(12):2073-9.

doi:10.1084/jem.187.12.2073。

作者

P Kanakaraj先生¹, P H谢弗, D E Cavender公司, 吴彦祖, K Ngo公司, P F润滑油, S A华兹华斯, P A彼得森, J J西基尔卡, C A哈里斯, W P丰隆

附属

¹R.W.Johnson制药研究所，美国加利福尼亚州圣地亚哥92121。

PMID： 9625767
预防性维修识别码： PMC2212370型
内政部： 10.1084/jem.187.12.2073

摘要

白细胞介素（IL）-1是一种在炎症中具有多效性作用的促炎细胞因子。IL-1与其受体结合可触发一系列信号事件，包括激活应激激活的有丝分裂原活化蛋白（MAP）激酶、c-Jun NH2-末端激酶（JNK）和p38 MAP激酶以及转录因子核因子κB（NF-kappaB）。IL-1信号传导通过诱导炎症基因产物如IL-6而导致细胞反应。IL-1信号传导中最早的事件之一是IL-1受体相关激酶IRAK和IRAK-2与受体复合体的快速相互作用。IRAK和IRAK-2在IL-1信号通路和随后的细胞反应中的相对作用尚未确定。为了评估IRAK在IL-1信号传导中的重要性，制备并研究了IRAK缺失的小鼠成纤维细胞。在这里，我们报告了IL-1介导的JNK、p38和NF-kappaB的激活在IRAK表达缺陷的胚胎成纤维细胞中均减少。此外，IRAK缺陷小鼠的胚胎成纤维细胞和皮肤成纤维细胞对IL-1产生的IL-6也显著减少。我们的结果表明，IRAK在协调多种IL-1信号通路以最佳诱导细胞反应方面发挥着重要的近端作用。

PubMed免责声明

数字

图1
IRAK缺陷细胞中缺乏IRAK表达。(A类)小鼠IRAK基因图谱和构建体。用含有小鼠IRAK基因5′部分的基因组DNA片段作为同源区域进行重组。该基因的外显子5至外显子7被新霉素抗性基因盒取代(*近地天体*). 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(*HSV-TK病毒*)放置在构件的3′处。限制地点为BamHI(B类)、生态研究院(E类)和SpeI(*S公司*). (B类)男性胚胎干细胞中单个IRAK等位基因的破坏。使用EcoRI消化来自带有野生型（+）或中断型（−）IRAK基因的胚胎干细胞的基因组DNA，并将其杂交到如A类在杂交中检测到的野生型等位基因的12-kb DNA带和破坏的等位基因2.6-kb带也显示在A类. (C类)IRAK缺陷细胞中缺乏IRAK蛋白。按照材料和方法中的描述制备原代胚胎EF细胞。用10%SDS-PAGE分离来自对照（+）和IRAK缺陷（−）EF细胞的蛋白质，并使用IRAK特异性抗体通过免疫印迹检测IRAK。随后用细胞外信号调节激酶2抗体进行印迹，证明蛋白质负载相等(*ERK-2号机组*).

图1
IRAK缺陷细胞中缺乏IRAK表达。(A类)小鼠IRAK基因图谱及构建。用含有小鼠IRAK基因5′部分的基因组DNA片段作为同源区域进行重组。该基因的外显子5至外显子7被新霉素抗性基因盒取代(*近地天体*). 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(*HSV-TK病毒*)放置在构件的3′处。限制地点为BamHI(B类)、生态研究院(E类)和SpeI(*S公司*). (B类)男性胚胎干细胞中单个IRAK等位基因的破坏。使用EcoRI消化来自带有野生型（+）或中断型（−）IRAK基因的胚胎干细胞的基因组DNA，并将其杂交到如A类在杂交中检测到的野生型等位基因的12-kb DNA带和破坏的等位基因2.6-kb带也显示在A类. (C类)IRAK缺陷细胞中缺乏IRAK蛋白。按照材料和方法中的描述制备原代胚胎EF细胞。用10%SDS-PAGE分离来自对照（+）和IRAK缺陷（−）EF细胞的蛋白质，并使用IRAK特异性抗体通过免疫印迹检测IRAK。随后用细胞外信号调节激酶2的抗体进行印迹，证明了蛋白质的负载量相等(*ERK-2号机组*).

图1
IRAK缺陷细胞中缺乏IRAK表达。(A类)小鼠IRAK基因图谱及构建。使用包含小鼠IRAK基因5′部分的基因组DNA片段作为同源区域进行重组。该基因的外显子5至外显子7被新霉素抗性基因盒取代(*近地天体*). 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(*HSV-TK型*)放置在构件的3′处。限制地点为BamHI(B类)、生态研究院(E类)和SpeI(*S公司*). (B类)男性胚胎干细胞中单个IRAK等位基因的破坏。使用EcoRI消化来自带有野生型（+）或中断型（−）IRAK基因的胚胎干细胞的基因组DNA，并将其杂交到如A类在杂交中检测到的野生型等位基因的12-kb DNA带和破坏的等位基因2.6-kb带也显示在A类. (C类)IRAK缺陷细胞中缺乏IRAK蛋白。按照材料和方法中的描述制备原代胚胎EF细胞。用10%SDS-PAGE分离来自对照（+）和IRAK缺陷（−）EF细胞的蛋白质，并使用IRAK特异性抗体通过免疫印迹检测IRAK。随后用细胞外信号调节激酶2抗体进行印迹，证明蛋白质负载相等(*ERK-2号机组*).

图2
在IRAK缺陷的EF细胞中，缺陷的IL-1诱导p38和JNK活化。用IL-1β（0.1–10 ng/ml）或TNF-α（100 ng/ml。(A类)MAPKAPK2通过免疫沉淀p38磷酸化，c-Jun通过免疫沉淀JNK1磷酸化。p38和JNK1的蛋白质印迹作为负荷对照。(B类)p38和JNK1激活的定量。p38和JNK1激酶分析通过荧光成像仪（分子动力学）进行定量，并根据Western blotting检测到的每个样品的p38或JNK1的数量以及每个分析中未刺激IRAK缺乏EF细胞的活性进行标准化。p38数据代表三个实验，JNK1数据表示为两个实验的平均值。

图3
IL-1减少IRAK缺陷细胞中NF-κB通路的激活。(A类)IRAK缺陷EF细胞中IκB的低效降解。对照（+）和IRAK缺陷（−）细胞在37°C下用IL-1刺激15分钟。用SDS-PAGE分离细胞裂解液中的蛋白质，并用IκB-α特异性抗体检测IκB。随后用细胞外信号调节激酶2特异性抗体对同一滤纸进行印迹，证明样品装载量相等(*ERK-2号机组*). 蛋白质条带的强度通过密度计进行定量。IL-1刺激的细胞中IκB的量以未刺激细胞中IκB的百分比表示。(B类)IL-1降低IRAK缺陷细胞中NF-κB的活化。在37°C下用IL-1或TNF-α刺激EF细胞30分钟。制备核提取物，并用电泳迁移率变化法测定NF-κB DNA结合活性。这些数据代表了两个具有类似结果的独立实验。

图3
IL-1减少IRAK缺陷细胞中NF-κB通路的激活。(A类)IRAK缺陷EF细胞中IκB的低效降解。用IL-1在37°C下刺激对照（+）和IRAK缺陷（−）细胞15分钟。用SDS-PAGE分离细胞裂解液中的蛋白质，并用IκB-α特异性抗体检测IκB。随后用细胞外信号调节激酶2特异性抗体对同一滤纸进行印迹，证明样品装载量相等(*ERK-2号机组*). 蛋白质条带的强度通过密度计进行定量。IL-1刺激的细胞中IκB的数量表示为未刺激细胞中的百分比。(B类)IL-1降低IRAK缺陷细胞中NF-κB的活化。在37°C下用IL-1或TNF-α刺激EF细胞30分钟。制备核提取物，并用电泳迁移率变化法测定NF-κB DNA结合活性。这些数据代表了两个具有类似结果的独立实验。

图4
IRAK缺陷细胞中IL-1对IL-6的诱导降低。(A类)IRAK缺陷细胞中IL-6 mRNA的诱导减少。用IL-1或TNF-α在37°C下处理对照（+）和IRAK缺陷（−）EF细胞3小时。通过Northern杂交检测不同样本中IL-6 mRNA的表达，并在荧光成像仪上进行定量。(B类)IRAK缺陷细胞分泌IL-6的诱导减少。控制（+）和IRAK不足（−）EF(顶部)和SF(底部)用IL-1在37°C下刺激细胞8小时。ELISA法测定培养上清中分泌IL-6的量。

图4
IL-1减少IRAK缺陷细胞中IL-6的诱导。(A类)IRAK缺陷细胞中IL-6 mRNA的诱导减少。用IL-1或TNF-α在37°C下处理对照（+）和IRAK缺陷（−）EF细胞3小时。通过Northern杂交检测不同样本中IL-6 mRNA的表达，并在荧光成像仪上进行定量。(B类)减少了IRAK缺陷细胞分泌IL-6的诱导作用。控制（+）和IRAK不足（−）EF(顶部)和SF(底部)用IL-1在37°C下刺激细胞8小时。ELISA法测定培养上清中分泌IL-6的量。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

不同白细胞介素-1受体相关激酶（IRAK）家族成员的功能多样性和调节。
Janssens S，Beyaert R。 Janssens S等人。分子细胞。2003年2月；11(2):293-302. doi:10.1016/s1097-2765（03）00053-4。分子细胞。2003 PMID：12620219 审查。
缺乏IRAK-4的小鼠白细胞介素-1和Toll样受体信号严重受损。
铃木N、铃木S、邓肯GS、Millar DG、Wada T、Mirtsos C、Takada H、Wakeham A、Itie A、Li S、Penninger JM、Wesche H、Ohashi PS、Mak TW、Yeh WC。铃木N等人。自然。2002年4月18日；416(6882):750-6. doi:10.1038/nature736。Epub 2002年3月31日。自然。2002 PMID：11923871
【I型白细胞介素-1受体调节机制的体内外研究】。
塔基T。塔基T。雅库加库·扎西。2001年1月；121(1):9-21. doi:10.1248/yakushi.121.9。雅库加库·扎西。2001 PMID：11201166 审查。日本人。
IL-1受体相关激酶（IRAK）表达对IL-1信号传导的影响与其激酶活性无关。
Knop J，马丁·密苏里州。 Knop J等人。 FEBS信函。1999年4月1日；448(1):81-5. doi:10.1016/s0014-5793（99）00322-1。 FEBS信函。1999 PMID：10217414
IL-1受体相关激酶（IRAK）缺陷小鼠中IL-18介导的自然杀伤和T辅助细胞1型反应缺陷。
Kanakaraj P、Ngo K、Wu Y、Angulo A、Ghazal P、Harris CA、Siekierka JJ、Peterson PA、Fung-Leung WP。 Kanakaraj P等人。《实验医学杂志》，1999年4月5日；189(7):1129-38. doi:10.1084/jem.189.7.1129。《实验医学杂志》，1999年。 PMID：10190904 免费PMC文章。

查看所有类似文章

引用人

IL-1RAP，癌症的关键治疗靶点。
Frenay J、Bellaye PS、Oudot A、Helbling A、Petitot C、Ferrand C、Collin B、Dias AMM。 Frenay J等人。国际分子科学杂志。2022年11月29日；23(23):14918. doi:10.3390/ijms232314918。国际分子科学杂志。2022 PMID：36499246 免费PMC文章。审查。
阿那金拉治疗降低新型冠状病毒肺炎患者炎症生物标志物的疗效：一项荟萃分析。
Naveed Z、Sarwar M、Ali Z、Saeed D、Choudhry K、Sarfraz A、Sarfras Z、Felix M、Cherrez-Ojeda I。 Naveed Z等人。临床实验室分析杂志。2022年6月；36（6）：e24434。doi:10.1002/jcla.24434。Epub 2022年4月18日。临床实验室分析杂志。2022 PMID：35435272 免费PMC文章。
白细胞介素-1受体相关激酶-3（IRAK3）在细胞培养模型中调节炎症标记物表达的功能分析：系统综述和荟萃分析。
Nguyen TH、Turek I、Meehan-Andrews T、Zacharias A、Irving H。 Nguyen TH等人。公共科学图书馆一号。2020年12月31日；15（12）：e0244570。doi:10.1371/journal.pone.0244570。eCollection 2020。公共科学图书馆一号。2020 PMID：33382782 免费PMC文章。
叶下珠及其主要成分对细胞信号通路的调节：在预防和治疗炎症和癌症中的潜在作用。
Harikrishnan H、Jantan I、Alagan A、Haque MA。 Harikrishnan H等人。炎症药理学。2020年2月；28(1):1-18. doi:10.1007/s10787-019-00671-9。Epub 2019年12月2日。炎症药理学。2020 PMID：31792765 审查。
球状脂联素通过IκB/NF-κB通路激活发挥促炎症作用，通过IRAK-1下调发挥抗炎症作用。
Lee KH、Jeong J、Woo J、Lee CH、Yoo CG。 Lee KH等人。分子细胞。2018年8月31日；41(8):762-770. doi:10.14348/molcells.2018.005。Epub 2018年7月30日。分子细胞。2018 PMID：30078230 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Dinarello CA。白细胞介素-1在疾病中的生物学基础。鲜血。1996;87:2095–2147.-公共医学
1. Glacum MB、Stocking KL、Charrier K、Smith JL、Willis CR、Maliszewski C、Livingston DJ、Peschon JJ、Morrissey PJ。缺乏IL-1 I型受体的小鼠的表型和功能特征。免疫学杂志。1997;159:3364–3371.-公共医学
1. Labow M、Shuster D、Zetterstrom M、Nunes P、Terry R、Cullinan EB、Bartfai T、Solorzano C、Moldawer LL、Chizhonite R、Mclntyre KW。IL-1Ⅰ型受体缺乏小鼠中IL-1信号缺失和炎症反应减少。免疫学杂志。1997;159:2452–2461.-公共医学
1. Leon LR，加利福尼亚州康涅狄格州，Glacum M，Kluger MJ。IL-1 I型受体介导小鼠对松节油的急性期反应，但不介导脂多糖。美国生理学杂志。1996;271:R1668–R1675。-公共医学
1. Zheng H、Fletcher D、Kozak W、Jiang M、Hofmann KJ、Conn CA、Soszynski D、Grabiec C、Trumbauer ME、Shaw A等。白细胞介素-1β缺乏小鼠的发热诱导耐受性和急性期反应受损。免疫。1995;3:9–19.-公共医学

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

LinkOut-更多资源

[1] Dinarello CA。白细胞介素-1在疾病中的生物学基础。鲜血。1996;87:2095–2147.-公共医学

[2] Dinarello CA。白细胞介素-1在疾病中的生物学基础。鲜血。1996;87:2095–2147.-公共医学

[3] Glacum MB、Stocking KL、Charrier K、Smith JL、Willis CR、Maliszewski C、Livingston DJ、Peschon JJ、Morrissey PJ。缺乏IL-1 I型受体的小鼠的表型和功能特征。免疫学杂志。1997;159:3364–3371.-公共医学

[4] Glacum MB、Stocking KL、Charrier K、Smith JL、Willis CR、Maliszewski C、Livingston DJ、Peschon JJ、Morrissey PJ。缺乏IL-1 I型受体的小鼠的表型和功能特征。免疫学杂志。1997;159:3364–3371.-公共医学

[5] Labow M、Shuster D、Zetterstrom M、Nunes P、Terry R、Cullinan EB、Bartfai T、Solorzano C、Moldawer LL、Chizhonite R、Mclntyre KW。IL-1Ⅰ型受体缺乏小鼠中IL-1信号缺失和炎症反应减少。免疫学杂志。1997;159:2452–2461.-公共医学

[6] Labow M、Shuster D、Zetterstrom M、Nunes P、Terry R、Cullinan EB、Bartfai T、Solorzano C、Moldawer LL、Chizhonite R、Mclntyre KW。IL-1Ⅰ型受体缺乏小鼠中IL-1信号缺失和炎症反应减少。免疫学杂志。1997;159:2452–2461.-公共医学

[7] Leon LR，加利福尼亚州康涅狄格州，Glacum M，Kluger MJ。IL-1 I型受体介导小鼠对松节油的急性期反应，但不介导脂多糖。美国生理学杂志。1996;271:R1668–R1675。-公共医学

[8] Leon LR，加利福尼亚州康涅狄格州，Glacum M，Kluger MJ。IL-1 I型受体介导小鼠对松节油的急性期反应，但不介导脂多糖。美国生理学杂志。1996;271:R1668–R1675。-公共医学

[9] Zheng H、Fletcher D、Kozak W、Jiang M、Hofmann KJ、Conn CA、Soszynski D、Grabiec C、Trumbauer ME、Shaw A等。白细胞介素-1β缺乏小鼠的发热诱导耐受性和急性期反应受损。免疫。1995;3:9–19.-公共医学

[10] Zheng H、Fletcher D、Kozak W、Jiang M、Hofmann KJ、Conn CA、Soszynski D、Grabiec C、Trumbauer ME、Shaw A等。白细胞介素-1β缺乏小鼠的发热诱导耐受性和急性期反应受损。免疫。1995;3:9–19.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

白细胞介素（IL）-1受体相关激酶（IRAK）对多种IL-1信号通路和IL-6产生的最佳诱导需求

附属

白细胞介素（IL）-1受体相关激酶（IRAK）对多种IL-1信号通路和IL-6产生的最佳诱导需求

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

研究材料

其他

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

研究材料

其他