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.1998年4月24日;273(17):10755-62.
doi:10.1074/jbc.273.17.10755。

蛋白激酶CβI/绿色荧光蛋白结合物的动态运输可视化揭示了G蛋白偶联受体激活和脱敏的差异

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蛋白激酶CβI/绿色荧光蛋白结合物的动态运输可视化揭示了G蛋白偶联受体激活和脱敏的差异

X Feng公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

蛋白激酶C(PKC)将各种细胞外信号与细胞内反应联系起来,并被多种细胞内因子激活,包括二酰甘油、Ca2+和花生四烯酸。在这项研究中,我们使用一种全功能绿色荧光蛋白偶联PKCbetaII(GFP-PKCbetalII),展示了一种新的方法来研究在G蛋白偶联受体激活后活细胞中PKC的动态再分配。激动剂诱导的PKC易位是快速、短暂的,并且选择性地由Gqalpha-而不是Gsalpha-或Gialpha-偶联受体的激活介导。有趣的是,尽管刺激持续存在,但只观察到PKC膜移位的一个短暂峰值,这与信号通路的快速脱敏相一致。此外,当GFP-PKCbetaII用于检测两个Gqalpha-coupled受体(血管紧张素II 1A型受体(AT1AR)和内皮素A受体(ETAR))之间的串扰时,ETAR的激活导致随后的AT1AR反应性丧失,而AT1AR的刺激不会导致ETAR信号的脱敏。GFP-PKCbetaII的开发不仅可以实时显示活细胞对生理刺激的动态PKC贩运,而且还为评估磷脂酶C信号通路相关受体的激活和脱敏提供了直接而敏感的手段。

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