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.1998年4月24日;273(17):10279-87.
doi:10.1074/jbc.273.17.10279。

一种新型受体激活的小鼠脑TRP-Ca2+通道的分子克隆及功能表征

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一种新型受体激活的小鼠脑TRP-Ca2+通道的分子克隆及功能表征

T冈田等。 生物化学杂志. .
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摘要

果蝇TRP蛋白的哺乳动物同源物可诱导光感受器中的光激活Ca2+电导,其特征研究是理解脊椎动物细胞中受体激活Ca2+内流的分子机制的重要线索。我们在此分离出编码一种新型TRP同源物TRP5的cDNA,TRP5主要在大脑中表达。TRP5 cDNA在人胚胎肾细胞中的重组表达显著增强了ATP诱导的细胞外Ca2+依赖性升高。这些[Ca2+]i瞬变被SK&F96365(受体激活Ca2+进入的阻断剂)和La3+抑制。然而,TRP5 cDNA的表达并未显著影响由thapsigargin(内质网Ca2+-ATP酶抑制剂)诱导的[Ca2+]i瞬变。三磷酸腺苷(ATP)刺激用thapsigargin预处理以耗尽内部Ca2+储存的TRP5转染细胞,导致完整的细胞外Ca2+依赖性[Ca2+]i瞬变,而三磷酸腺苷酶抑制用thapisgargin处理的对照细胞中的[Ca2+/]i。此外,在ATP刺激的TRP5表达细胞中,内部Ca2+储存释放的Ca2+与细胞外Ca2+内流之间没有显著相关性。全细胞模式的TRP5表达细胞斑贴灯记录表明,在细胞外Ca2+存在的情况下,ATP应用可诱导大的内向电流。从吸管内溶液中省略Ca2+可消除TRP5表达细胞中的电流,而10 nM的吸管内Ca2+足以支持ATP受体刺激触发的TRP5活性。根据该电流的零电流电位估计的渗透率为PCa:PNa:PC=14.3:1。5:1. 我们的研究结果表明,TRP5通过一条涉及Ca2+但不消耗哺乳动物细胞中Ca2+储存的途径,引导由受体刺激激活的Ca2+选择性离子通道的形成。

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