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.1998年4月6日；187(7):997-1007.
doi:10.1084/jem.187.7.997。

淋巴毒素和B细胞在脾滤泡发育中的顺序作用

M冈萨雷斯 1, F麦凯, J L布朗宁, M H Kosco Vilbois公司, R J诺埃尔
附属公司

淋巴毒素和B细胞在脾滤泡发育中的顺序作用

M冈萨雷斯等。 实验医学杂志. .

摘要

将淋巴细胞转移到严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠体内会导致脾脏发生一系列组织学变化，包括出现成熟滤泡树突状细胞（FDC）。研究旨在阐明淋巴毒素（LT）在这一过程中的作用。结果表明，SCID小鼠有一个小的部分分化的白髓，含有边缘区和叉指状树突细胞，但缺乏FDCs。移植的脾细胞在注射到SCID小鼠后不久即可分离为T和B细胞区。这种能力依赖于通过LT-beta受体（LT-betaR）的信号传导，因为阻断受体SCID小鼠的配体-受体相互作用会破坏转移细胞的分离能力。淋巴细胞转移一周后，重组SCID小鼠中出现宿主衍生的FDC。这种对FDC的诱导依赖于B细胞的LT-betaR信号，因为即使在LT-alpha+/+T细胞共转染后，LT-alpha-/-B细胞也无法在SCID小鼠中诱导FDC的发育。因此，LT在脾组织中起着至少两种不同的作用。首先，LT似乎诱导白髓分化，为淋巴细胞分离创造场所。其次，B细胞的LT表达推动了FDC的成熟和B细胞滤泡的组织。

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图1
图1
用野生型淋巴细胞重建后第1天SCID中B和T细胞区的正常分离。以低倍显示截面(A类)和高倍放大(B–D类)接受静脉注射野生型同基因淋巴细胞的SCID脾脏。切片被抗CD19 FITC染色(绿色)，抗MAdCAM-1生物素+链霉亲和素PE(红色)抗CD4 Cy5和抗CD8 Cy5(蓝色).A类和B类显示三重染色，C类显示红色和蓝色信号，以及D类显示绿色和蓝色信号。这些显微照片代表了至少三个不同的实验，每个实验组有两只动物。目标：×2.5(A类)和×20(B–D类)，变焦1.5–2.5。B类，B细胞滤泡；T型，T细胞面积；MZ公司边缘带；加利福尼亚州，中央小动脉。
图1
图1
用野生型淋巴细胞重建后第1天SCID中B和T细胞区的正常分离。以低倍显示截面(A类)和高倍放大(B–D类)接受静脉注射野生型同基因淋巴细胞的SCID脾脏。切片被抗CD19 FITC染色(绿色)，抗MAdCAM-1生物素+链霉亲和素PE(红色)抗CD4 Cy5和抗CD8 Cy5(蓝色).A类和B类显示三重染色，C类显示红色和蓝色信号，以及D类显示绿色和蓝色信号。这些显微照片代表了至少三个不同的实验，每个实验组有两只动物。目标：×2.5(A类)和×20(B–D类)，变焦1.5–2.5。B类，B细胞滤泡；T型，T细胞面积；MZ公司边缘带；加利福尼亚州，中央小动脉。
图2
图2
SCID小鼠白髓的表型。部分显示为野生型(左列)，SCID公司(中间立柱)，和前一天接受同基因脾细胞的SCID小鼠(右立柱). 切片用αCD19 FITC（B细胞标记物）、αMAdCAM-1生物素+链霉亲和素PE（边缘窦衬里细胞标记物，以及αFDC-M1 FITC和αFDC-M2生物素+链霉亲和素PE（FDC标记）。黄色表示在相同的绿色和红色区域内共定位，在所用分辨率下，不区分单个阳性细胞和双阳性细胞。这些显微照片代表了至少三个不同的实验，每个实验组有两只动物。物镜：×2.5，变焦1.5–2.5。B类，B细胞滤泡；T型，T细胞面积；MZ公司边缘带；加利福尼亚州，中央小动脉。
图3
图3
LT-βR信号通路的阻断干扰了短期转移至SCID后B和T细胞的分离归巢。SCID小鼠腹腔注射200μg融合蛋白LT-βR–Ig(A类和B类)或多克隆人Ig作为对照(C类和D类). 1周后，静脉注射野生型(A类和C类)或LT-α−/−脾细胞(B类和D类). 第二天，采集脾脏并用共焦显微镜进行分析。切片用αCD19 FITC、αCD4 Cy5和αCD8 Cy5染色。这些显微照片代表了至少三个不同的实验，每个实验每组两只动物。物镜：×20，变焦1.5–2.5。B类，B细胞滤泡；T型，T细胞面积；加利福尼亚州，中央小动脉。
图4
图4
将同基因细胞移植到经LT-βR-Ig治疗的SCID小鼠1周后，B细胞异常分离，未能诱导FDCs分化。SCID小鼠静脉注射同基因脾细胞加融合蛋白LT-βR–Ig(B类,D类、和F类)或多克隆人Ig(A类,C类、和E类). 1周后，用αCD19 FITC和αMAdCAM-1生物素+链霉亲和素PE对脾脏切片进行染色(A类和B类)、αCD19 FITC和αFDC-M1生物素+链霉亲和素PE(C类和D类)和αCD19 FITC和αFDC-M2生物素+链霉亲和素PE(E类和F类). 黄色表示在相同的绿色和红色区域内共定位，在所用分辨率下，不区分单个阳性细胞和双阳性细胞。这些显微照片代表了至少三个不同的实验，每个实验组有两只动物。物镜：×2.5，放大1.5–2.5。F类，滤泡样B细胞区；R（右），环状B细胞区；MZ公司，边缘区。
图5
图5
LT-α−/−B细胞移植到SCID小鼠后未能诱导FDC并异常分离。静脉注射野生型脾细胞给SCID小鼠(A–C)，野生型B细胞加上LT-α−/−T细胞(D–F型)，野生型T细胞加LT-α−/−B细胞(G–I型)，或LT-α−/−脾细胞(J–L型). 2周后，用αCD19 FITC和αFDC-M1生物素+链霉亲和素PE对脾脏切片进行染色(A类,D类,G公司、和J型)、αCD19 FITC和αFDC-M2生物素+链霉亲和素PE(B类,E类,H（H）、和K（K）)和αMAdCAM-1生物素+链霉亲和素PE、αCD19 FITC、αCD4 Cy5和αCD8 Cy5(C类,F类,我、和L（左）)共聚焦显微镜分析。黄色表示在相同的绿色和红色染色区域内共定位，在使用的分辨率下，无法区分单个阳性细胞和双阳性细胞。这些显微照片代表了至少三个不同的实验，每个实验每组两只动物。目的：×2.5，除右栏外：×20；缩放1.5–2.5。T型，T细胞面积；F类，滤泡样B细胞区；R（右），环状B细胞区；MZ公司，边缘区。
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