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.1998年2月15日；18（4）：1428-39。
doi:10.1523/JNEUROSCI.18-04-01428.1998。

广泛消除Bax缺陷小鼠自然发生的神经元死亡

F A白色 1, C R Keller-Peck公司, C M克努森, S J Korsmeyer公司, W D施奈德
附属公司

广泛消除Bax缺陷小鼠自然发生的神经元死亡

F A白色等。 神经科学. .

摘要

在营养因子剥夺的情况下，促凋亡分子BAX是交感和运动神经元死亡所必需的。此外，成年Bax-/-小鼠比野生型小鼠有更多的运动神经元。这些发现增加了BAX调节许多神经元群体发育过程中自然发生的细胞死亡的可能性。为了验证这一想法，我们在Bax-/-小鼠胚胎发育和出生后早期发育期间，使用TUNEL标记在几个研究充分的神经系统中评估了细胞凋亡。值得注意的是，在胚胎第11.5天（E11.5）和出生后第1天（PN1）之间，大多数外周神经节、脊髓运动池和三叉神经脑干核复合体中的自然发生的细胞死亡几乎被消除。此外，在发育中的小脑、视网膜的某些层和海马体中，细胞死亡虽然没有消除，但减少了。背根和腹根以及面神经和视神经的轴突计数证实了细胞的保存，显示轴突数量增加了24-35%。有趣的是，许多多余的轴突的横截面积非常小，这表明相关的神经元并不正常。我们得出结论，BAX是胚胎期外周和中枢神经细胞自然死亡的关键介体。然而，从自然发生的细胞死亡中拯救出来并不意味着神经元将发展出正常的功能能力。

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数字

图1。
图1。
使用TUNEL方法对野生型和非野生型脊髓腹侧和DRG中FITC-标记细胞的显微照片Bax公司空突变小鼠（E12.5–E14.5）。注意，在野生型DRG和脊髓腹侧可见大量FITC-标记细胞，而在Bax公司无突变的室友。DRG公司，背根神经节；VH公司，脊髓腹角。比例尺，50μm。
图2。
图2。
比较野生型和野生型DRG和运动池中TUNEL标记细胞数量的直方图Bax公司使突变小鼠无效。阶段性野生型DRG和腹侧脊髓中TUNEL标记细胞的总数(灰色条)和Bax公司空突变体(黑色条)展示的是老鼠。细胞数量表示为DRG和脊髓腹侧各部分中TUNEL标记细胞的平均数量。请注意，TUNEL标记的细胞在所有检查日几乎都不存在Bax公司null突变体。
图3。
图3。
甲酚紫染色三叉神经节（E11.5–E17.5）的显微照片(左边)以及使用TUNEL方法标记的相应截面(中心和正确的)野生型和Bax公司分别为空的突变配偶。请注意，在显示的每个年龄段的野生型三叉神经节中都可见大量FITC-标记细胞(中心)，而FITC-标记的细胞在Bax公司无突变的同窝伙伴(正确的). 比例尺，50μm。
图4。
图4。
出生后野生型TBNC和小脑的甲酚紫染色和TUNEL标记Bax公司null突变体。TBNC甲酚紫染色的低倍和高倍显微照片(顶部,左边)和相应的高功率TUNEL标签部分(顶部,正确的)PN1处显示。注意中没有TUNEL标签Bax−/−TBNC公司(顶部,最右边的). 甲酚紫染色小脑MZ的显微照片和PN1的TUNEL法(中间的)和PN4(底部)野生型和Bax公司显示了无效突变小鼠。注意野生型小脑的MZ中PN1和PN4的广泛标记。TBNC公司三叉神经脑干核复合体；MZ公司边缘带；EGL公司外颗粒细胞层；D类，背侧；L（左），侧面。比例尺，50μm。
图5。
图5。
TUNEL标记细胞在野生型和Bax公司E11.5的空突变小鼠(顶部)，视神经Bax公司E17.5处用甲酚紫染色的空突变体和相应的TUNEL标记片段(中间的)以及野生型和Bax公司PN4突变小鼠为空(底部). 在眼睛发育中的神经上皮中观察到大量TUNEL标记细胞(顶部)以及视神经的胶质细胞(中间的,箭头)野生型和Bax−/−动物。相反，TUNEL阳性细胞不存在于Bax公司PN4处的空突变，此时细胞死亡达到峰值(底部).星号、视交叉；视网膜神经节细胞层；甚高频玻璃般的幽默。比例尺，50μm。
图6。
图6。
成年野生型和野生型视神经中有髓鞘轴突的半薄切片Bax公司使突变小鼠无效。视神经大小的急剧增加Bax公司与野生型同窝出生的小鼠相比，显示了无效突变小鼠(顶部，低倍放大）。视神经直径的增加可归因于脑内轴突数量的增加Bax公司与Bax公司+/+展示的是老鼠(底部，高倍放大）。还应注意有髓轴突的跨板缩小。比例尺，50μm。
图7。
图7。
成人野生型和成人面神经有髓轴突的半薄切片Bax公司低倍镜下无突变小鼠。这个插入在更高的放大倍数下显示Bax公司无效突变神经明显萎缩。比例尺，50μm。
图8。
图8。
轴突和胞体的横截面积Bax−/−和野生型面神经核。成人野生型和野生型轴突面积的大小频率直方图Bax公司无突变面神经(顶部)如图所示。面神经核运动神经元横截面积的大小频率直方图Bax公司零突变和野生型同窝卵(底部)如图所示。
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