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.1998年1月9日;273(2):1150-7.
doi:10.1074/jbc.273.2.1150。

胆固醇和鞘脂通过促进洗涤剂不可溶有序膜结构域的形成增强糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白的Triton X-100不溶性

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胆固醇和鞘脂通过促进洗涤剂不可溶有序膜结构域的形成增强糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白的Triton X-100不溶性

R J施罗德等。 生物化学杂志. .
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摘要

糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白可从细胞、鞘脂和富含胆固醇的脂质体(SCRL)以及洗涤剂不溶性膜中分离出来。我们之前发现,脂类的洗涤剂不溶性是脂酰基链有序的相的特征。我们提出证据表明,GPI锚定蛋白是不溶性的,因为它们与胆固醇和富含鞘磷脂的脂质结构域相关,其性质类似于液相。在这里,这个模型通过各种方法进行了测试。首先,我们证明了皂苷可以从细胞膜中去除胆固醇,并允许Triton X-100溶解GPI-锚定蛋白,它对适当脂质组成的SCRL中的GPI-锚固蛋白碱性磷酸酶(PLAP)具有相同的作用。皂苷在细胞中的作用与简单脂质体相似,这表明该化合物破坏了蛋白质-脂质体的相互作用。然而,PLAP和胆固醇之间的直接相互作用不需要不溶性,因为蛋白质也不溶于含有有序相脂质的无胆固醇脂质体。相反,胆固醇的作用是通过鞘脂极大地促进洗涤剂不溶相的形成,鞘脂有形成有序相的倾向。我们认为皂苷可溶解GPI-锚定蛋白,因为细胞膜的脂质组成(以及上述使用的SCRL)支持胆固醇存在但不存在时有序相的形成。支持这一模型的是,皂苷并没有促进Triton X-100对PLAP在SCRL中的溶解,其鞘脂水平高到足以在没有胆固醇的情况下形成有序相。我们还表明,另外两种GPI-锚定蛋白在SCRL中是不溶于洗涤剂的,洗涤剂不会人为地创建有序结构域,也不会使溶解膜的成分与同一裂解液中不同双层中的耐洗涤剂膜相结合。我们的结论是,有序结构域模型解释了脂质体和细胞中耐洗涤剂膜的行为。

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