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.1997年9月:110(第18部分):2187-96。
doi:10.1242/jcs.110.18.2187。

整合素受体和纤维连接蛋白之间的相互作用是颅骨成骨细胞体外分化所必需的

合作者,附属机构

整合素受体和纤维连接蛋白之间的相互作用是颅骨成骨细胞体外分化所必需的

A M穆尔西等。 细胞科学杂志. 1997年9月.

摘要

我们之前表明,抗纤连蛋白抗体或含有中心细胞结合结构域的可溶性纤连蛋白片段在体外抑制胎儿颅骨成骨细胞形成矿化结节。这些发现表明纤维连接蛋白在成骨细胞分化和形态发生中起着关键作用。在本研究中,我们验证了以下假设:纤维连接蛋白对成骨细胞的成骨作用是通过与纤维连连接蛋白的整合素受体直接相互作用来介导的。免疫细胞化学分析确定了胎鼠颅骨组织和培养的成骨细胞在所有分化阶段的整合素-纤维连接蛋白受体α5ss1。在组织和细胞培养的所有阶段,还发现了其他三种整合素,即α3ss1、α8ss1和αvs3,它们可以结合纤维连接蛋白以及其他基质成分。免疫沉淀数据显示,在成骨细胞分化过程中,α5ss1水平保持不变,而在成熟矿化培养物中,α3ss1和α8ss1水平下降。为了确定矿化结节的成骨细胞形成是否需要整合素-纤维连接蛋白受体,我们检测了存在和不存在功能扰动性抗整合素抗体时结节形成的程度。从融合开始(第3天),抗体持续存在于培养物中,并在第10天和第20天测量结节形成。在这两个时间点,抗α5整合素亚单位抗体将结节形成减少到控制值的5%以下。对结节形成的抑制是可逆的,不会影响细胞的附着和活力。抗alpha3ss1和alpha8ss1的功能性干扰抗体也可将结节形成减少至对照值的20%以下。相反,αvss3和αvss5的功能干扰抗体并不影响结节的形成,这表明所观察到的抑制确实是特异性的。为了确定抗体治疗对基因表达的影响,检测了稳态mRNA表达,发现成骨细胞标记物碱性磷酸酶和骨钙素的表达受到抑制。总之,这些结果表明,成骨细胞与细胞外基质的直接相互作用是由一组选择的整合素受体介导的,该整合素受体包括α5ss1、α3ss1和α8ss1。我们进一步得出结论,特定的α5ss1纤维连接蛋白受体介导成骨细胞与骨形态发生和成骨细胞分化所需的纤维连连接蛋白之间的关键相互作用。

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