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.1997年11月7日;272(45):28198-201.
doi:10.1074/jbc.272.45.28198。

sentrin与泛素结合酶Ubc9的优先相互作用

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sentrin与泛素结合酶Ubc9的优先相互作用

L龚等人。 生物化学杂志. .
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摘要

Sentrin是一种泛素样分子,已被证明与Fas和肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、PML、Rad51、Rad52和RanGAP1的死亡结构域相互作用。我们之前已经报道过,sentrin可以以类似于蛋白质泛素化的方式与其他蛋白质偶联(Kamitani,T.,Nguyen,H.P.和Yeh,E.T.H.(1997)J.Biol。化学。272, 14001-14004). 此外,保守的C-末端Gly-Gly残基是发生sentrinization所必需的。为了鉴定在sentrinization中起作用的酶,使用酵母双杂交系统以sentrin为诱饵筛选人胎盘cDNA文库。发现一个强阳性相互作用克隆包含编码泛素结合酶Ubc9的cDNA插入。sentrin与Ubc9之间的相互作用需要其泛素结构域和C-末端Gly-Gly残基。这种相互作用似乎是特异性的,因为sentrin只能与UbcH5B弱相互作用,而不能与HHR6B、UbcH6或E2-EPF相互作用。体外翻译的sentrin可以被GST-Ubc9融合蛋白沉淀,但不能被谷胱甘肽S-转移酶沉淀。在体外结合试验中也可以鉴定出β-巯基乙醇敏感的Ubc9-sentrin偶联物。丝氨酸取代Ubc9保守的半胱氨酸残基,可消除Ubc9-sentrin结合物的形成。综上所述,Ubc9是sentrinization途径中关键结合酶的有力候选酶。

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