跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

Https公司

该站点是安全的。
这个https://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.1997年9月5日;251(2):144-52.
doi:10.1006/abio.1997.2259。

直接荧光法测定蛋白酶活性的淬火BODIPY染料标记酪蛋白底物

附属公司

直接荧光法测定蛋白酶活性的淬火BODIPY染料标记酪蛋白底物

L J琼斯等。 Ana Biochem公司. .

摘要

我们制备了两种BODIPY染料的酪蛋白偶联物,用于均匀分析中的荧光蛋白酶底物。这两种共轭物都被标记到这样的程度,以至于染料在蛋白质中被有效地淬灭,从而产生几乎无荧光的底物分子。这些荧光底物在蛋白酶消化后释放出高荧光BODIPY染料标记肽,荧光增加与酶活性成正比。这些猝灭底物适用于使用标准荧光计、滤光荧光计或荧光微板阅读器连续测定酶活性,使用荧光素激发和发射波长测量BODIPY FL酪蛋白水解或使用德克萨斯红波长检测BODIPY TR-X酪蛋白的蛋白水解。大多数检测蛋白酶活性的当前技术,如荧光素-硫代氨甲酰酪蛋白(FTC-酪蛋白)蛋白酶分析,需要大量操作,包括分离步骤,因此劳动密集且容易出错。相比之下,我们发现BODIPY染料标记酪蛋白蛋白酶检测方法简单准确,比FTC-酪蛋白检测方法具有更高的灵敏度和更广的检测动态范围。我们能够用这些新底物敏感地检测各种酶的活性,包括丝氨酸、酸、巯基和金属蛋白酶。我们还发现该分析适合于定量蛋白酶抑制剂浓度和实时分析蛋白质水解。

PubMed免责声明

类似文章

引用人

LinkOut-更多资源