Detection of an interaction between the HN and F proteins in Newcastle disease virus-infected cells

doi:10.1128/JVI.71.9.6287-6295.1997

.1997年9月；71(9):6287-95.

doi:10.1128/JVI.71.9.6287-6295.1997。

新城疫病毒感染细胞中HN和F蛋白相互作用的检测

J Stone-Hulslander公司¹, T G莫里森

附属公司

PMID： 9261345
预防性维修识别码：项目经理191901
内政部： 10.1128/JVI.71.9.6287-6295.1997

新城疫病毒感染细胞中HN和F蛋白相互作用的检测

J Stone-Hulslander公司等。 J维罗尔. 1997年9月.

.1997年9月；71(9):6287-95.

doi:10.1128/JVI.71.9.6287-6295.1997。

作者

J Stone-Hulslander公司¹, T G莫里森

附属

¹美国马萨诸塞大学医学院分子遗传学和微生物学系，伍斯特01655。

PMID： 9261345
预防性维修识别码： 2001年9月19日
内政部： 10.1128/JVI.71.9.6287-6295.1997

摘要

对于许多副粘病毒，包括新城疫病毒（NDV），合胞体的形成需要在同一细胞中表达两种表面糖蛋白（HN和F），证据表明，融合涉及HN蛋白和F蛋白之间的特定相互作用。因为在副粘病毒感染的细胞中，潜在的相互作用从未被证实，例如通过共免疫沉淀和交联来探索相互作用。在非放射性介质中经过5分钟的放射性脉冲以及2小时的追踪后，可以用异源抗血清沉淀HN和F蛋白，但浓度较低。化学交联增加了对细胞表面含HN和F蛋白复合物的检测。交联后，用单特异性抗血清沉淀含有这两种蛋白的中间和高分子量物种。交联后蛋白质与抗HN沉淀导致检测到复合物，这些复合物在凝胶的堆积区（160至300 kDa、150 kDa和74 kDa）电泳。交联后用抗F抗体获得的沉淀中含有迁移到凝胶堆料区的物种，在160至300 kDa、120 kDa和66 kDa之间。当用HN或F抗血清沉淀时，大小在160至300kDa范围内的三至四个离散的复合物包含HN和F蛋白。含有HN和F蛋白的复合物的交联不仅仅是病毒糖蛋白在细胞表面过度表达的一种功能，这是通过在感染后的早期时间点（病毒表面糖蛋白水平较低时）显示交联来解决的。使用感染NDV无毒株的细胞表明，化学交联的HN和F蛋白的沉淀与F0的裂解无关。此外，在使HN蛋白与其受体结合最大化的条件下，异源抗血清沉淀的HN和F0蛋白的百分比没有变化，但附着后沉淀的F1蛋白减少。这些数据表明HN和F蛋白在粗面内质网中相互作用。在HN蛋白与其受体连接时，HN蛋白经历构象变化，这导致相关F蛋白的构象变化，将疏水性融合肽释放到靶膜中并启动融合。

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