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比较研究
.1997年6月;272(6第1部分):G1463-72。
doi:10.1152/ajpgi.1997.272.6.G1463。

肠钠依赖性中性氨基酸转运蛋白B0的分子和功能表征

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比较研究

肠钠依赖性中性氨基酸转运蛋白B0的分子和功能表征

R凯库达等。 美国生理学杂志. 1997年6月.

摘要

我们从兔空肠和人肠道细胞系Caco-2中克隆了钠依赖性中性氨基酸转运蛋白B0(ATB0)。兔肠道ATB0(riATB0)cDNA编码541个氨基酸的蛋白质,具有10个潜在的跨膜结构域。当在HeLa细胞中表达时,riATB0以Na(+)依赖的方式调节包括谷氨酰胺在内的几种中性氨基酸的转运。riATB0不包括阴离子氨基酸、阳离子氨基酸和N-甲基化氨基酸。当在非洲爪蟾卵母细胞中表达时,riATB0使中性氨基酸的转运增加了数倍。诱导的转运活性是中性氨基酸特有的,与阴离子、阳离子和N-甲基化氨基酸没有明显的相互作用。然而,在酸性pH下,riATB0确实与阴离子氨基酸相互作用。在表达riATBO的卵母细胞中,中性氨基酸苏氨酸以-50 mV的保持电位激发内向电流。氨基酸激发电流对膜电位敏感。当膜电位超极化时,内向电流增加,但在约-30至-40 mV时,电流反向。如果膜电位去极化超过此值,苏氨酸会引发外向电流。我们还从人类肠道细胞系Caco-2克隆了ATB0。Caco-2 ATB0 cDNA还编码541个氨基酸的蛋白质,该蛋白质与人类绒癌细胞株JAR中表达的ATB0基本相同。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和RT-PCR产物的限制性分析表明,人肠道和人肾脏近端肾小管细胞系HKPT表达的ATB0与Caco-2细胞中表达的ATB相同。

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