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.1997年3月7日;266(4):656-64.
doi:10.1006/jmbi.1996.0815。

结合、封装和喷射:伴侣蛋白辅助折叠反应中的底物动力学

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结合、封装和喷射:伴侣蛋白辅助折叠反应中的底物动力学

N A兰森等。 分子生物学杂志. .
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摘要

有GroEL、GroES和ATP存在时,线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH)的折叠速度比无辅助时更快。当化学计量比接近等摩尔(mMDH亚基:GroEL低聚物)且GroE受体状态的表观解离常数至少为1 x 10(-8)M时,随着GroEL-ES浓度的增加,折叠速率的增加达到最大值。然而,即使在伴侣素浓度为4000 x K'时,即,在游离mMDH浓度可忽略不计的情况下,观察到的底物折叠速率保持在最佳状态,这不仅表明伴侣-mMDH复合物中发生折叠,而且表明该速率不受与GroEL上位点的任何相互作用的抑制。尽管mMDH能够折叠伴侣蛋白,但捕获实验表明其在复合物上的停留时间仅为20秒。这与ATP周转率和GroES在复合物上的停留时间有关,仅约为基质进入折叠状态所需时间的5%。结果表明,ATP通过三种功能状态的循环驱动伴侣蛋白复合体:(1)受体复合体,其中未折叠底物紧密结合;(2) 一种封装状态,在这种状态下,它被隔离,但失去了直接的蛋白质接触,因此折叠可以不受阻碍地进行;以及(3)强制衬底分离的喷射状态,无论衬底是否折叠。

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