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.1997年4月1日;7(4):246-52.
doi:10.1016/s0960-9822(06)00120-5。

CED-4诱导裂殖酵母中的染色质凝聚,并通过与CED-9的直接物理结合而被抑制

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CED-4诱导pombe裂殖酵母的染色质凝聚,并被与CED-9的直接物理结合所抑制

C詹姆斯等。 当前生物. .
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摘要

背景:线虫秀丽隐杆线虫的发育程序性细胞死亡(PCD)涉及三个主要基因。每个PCD都需要ced-3和ced-4基因,而ced-9的作用是防止这些基因在注定要存活的细胞中的促死作用。已确定ced-3和ced-9的脊椎动物同源物分别是编码caspase半胱氨酸蛋白酶和Bcl-2家族的基因。相比之下,没有已知的与ced-4同源的脊椎动物。CED-3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶是细胞凋亡的重要效应物,推测其通过切割特定靶底物发挥作用。然而,CED-9/Bcl-2和CED-4蛋白的分子功能尚不清楚。单细胞酵母波贝裂殖酵母与后生动物有许多共同的细胞特性,但没有确定的细胞自杀机制。因此,我们将S.pombe作为一个朴素的模型细胞系统,用于检测细胞死亡蛋白的生物效应。

结果:在葡萄球菌中诱导野生型ced-4表达导致快速的局部染色质凝集和致死。CED-4(K165Q)的假定核苷酸结合P-loop基序的突变消除了致死表型。CED-4对浓缩染色质的免疫定位表明,这种表型可能是由CED-4的固有活性引起的。ced-9的共表达阻止了ced-4诱导的染色质浓缩和致死,并导致ced-4重新定位到内质网和线粒体外膜。酵母双杂交分析证实了CED-4和CED-9之间的直接相互作用。

结论:我们利用葡萄球菌作为模型系统来检测CED-4的功能,确定了CED-4在染色质凝聚中的潜在直接作用。染色质凝聚是后生动物凋亡的一个普遍特征,尚未与效应器联系起来。在酵母双杂交分析中,CED-9介导的对CED-4诱导的致死性的挽救以及这两种蛋白质的相互作用表明,CED-8通过直接物理结合抑制CED-4的作用。

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