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.1996年11月15日;320(第一部分):33-8。
doi:10.1042/bj3200033。

吞噬细胞NADPH氧化酶黄素细胞色素b558亚基的化学计量学

附属公司

吞噬细胞NADPH氧化酶黄细胞色素b558亚基的计量学

T M Wallach公司等。 生物化学J. .

摘要

黄细胞色素b558是吞噬细胞NADPH氧化酶系统的跨膜成分,由两个亚单位组成,p22phox和gp91phox(phox代表吞噬细胞氧化酶)。纯化的黄细胞色素b556的亚基化学计量比已通过以下方法测定:(1)SDS/PAGE分离的考马斯蓝染色蛋白的密度测定,(2)变性条件下凝胶过滤分离后的亚基在280 mm处的芳香吸收,(3)双[磺基琥珀酰亚胺]二酸盐交联研究,其中,交联复合物的分子量通过Western blotting测定,(4)用125I-标记的Bolton-Henter试剂(N-琥珀酰-3-(4-羟基-5-[125I]碘苯基)丙酸盐)在赖氨酸残基上对纯黄细胞色素b556进行放射标记,然后进行SDS/PAGE并测定每个亚基的放射性。纯化的黄细胞色素b556中p22phox与gp91phox的比值通过定量Western和点划线与中性粒细胞膜中的比值相关联,以确保纯化过程中保持化学计量比。这些测量结果表明,这两个亚单位以1:1的摩尔比存在于中性粒细胞膜中。

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