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.1996年10月;122(10):3319-29.
doi:10.1242/dev.122.10.3319。

在转基因小鼠中通过定向肿瘤发生使垂体细胞在不同发育阶段永生

附属公司

在转基因小鼠中通过定向肿瘤发生使垂体细胞在不同发育阶段永生

E T阿拉里德等。 开发. 1996年10月.

摘要

转基因小鼠中癌基因的靶向表达可以使特定类型的细胞永生化,从而作为有价值的培养模型系统。利用特定细胞谱系中特定分化阶段表达的一组基因的启动子区域,我们证明靶向肿瘤发生可以产生代表连续发展阶段的细胞系,本质上允许空间和时间永生。我们的策略基于我们通过在转基因小鼠中使用人类糖蛋白激素α亚单位基因的促性腺激素特异区域来指导癌基因SV40 T抗原的表达,从而产生一个稳定但尚未成熟的垂体促性腺素细胞系。这些细胞合成α亚基和促性腺激素释放激素(GnRH)受体,但尚未完全分化,因为它们不合成黄体生成素(LH)或卵泡刺激素(FSH)的β亚基。这一观察结果导致了这样一种假设,即使用在发育早期或晚期激活的启动子靶向肿瘤发生,可能会使更原始或更分化的细胞永生。为了验证这一假设,我们使用LHbeta启动子使代表随后促性腺激素分化阶段的细胞永生化(α亚单位、GnRH受体和LHβ亚单位的表达,但不是FSHβ亚单位)。相反,用较长的人类α-亚单位基因片段(在发育早期激活)靶向肿瘤发生导致更原始的祖细胞永生化,仅表达α-亚单元基因。有趣的是,该转基因还使甲状腺谱系的永生化细胞表达甲状腺刺激激素的α亚基和β亚基以及转录因子GHF-1(Pit-1)。因此,靶向肿瘤发生使哺乳动物细胞在特定分化阶段永生,并允许产生一系列培养细胞系,代表给定细胞系中分化的连续阶段。

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