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比较研究
.1996年11月;16(11):6494-508.
doi:10.128/MCB.16.11.6494。

酵母和哺乳动物细胞中促凋亡蛋白Bax的结构功能比较

附属公司
比较研究

酵母和哺乳动物细胞中促凋亡蛋白Bax的结构功能比较

哈扎等。 分子细胞生物学. 1996年11月.

摘要

在GAL10启动子的控制下,促凋亡蛋白Bax在酿酒酵母中的表达导致半乳糖诱导的细胞死亡。免疫荧光研究表明Bax主要与酵母细胞中的线粒体有关。从Bax中去除羧基末端跨膜(TM)结构域[生成Bax(deltaTM)]阻止靶向线粒体,并完全消除酵母细胞中的细胞毒性功能,这表明膜靶向对Bax介导的致死性至关重要。将酵母线粒体外膜蛋白Mas70p的TM结构域与Bax(deltaTM)融合,恢复了酵母细胞中线粒体的靶向性和细胞毒功能。从Bax的BH3结构域中删除四个非常保守的氨基酸(IGDE)会破坏其同源二聚体的能力,并完全消除酵母细胞中的致死性。相比之下,一些保持同二聚体能力的Bax突变体(deltaBH1、deltaBH2和delta1-58)在酵母细胞中也至少保留了部分致死功能。在联合免疫沉淀实验中,野生型Bax蛋白在Rat-1成纤维细胞和293上皮细胞中的表达可诱导凋亡,而Bax(deltaIGDE)突变体未能诱导凋亡,且与内源性野生型Bax蛋白无关。与酵母细胞相比,Bax(deltaTM)蛋白在Rat-1和293细胞中保留细胞毒性功能,主要靶向线粒体,并在哺乳动物细胞中与内源性Bax二聚。因此,二聚化介导BH3结构域并靶向线粒体膜似乎对Bax在酵母和哺乳动物细胞中的细胞毒功能至关重要。

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