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.1996年8月15日;15(16):4246-53.

霍乱毒素AB5四级结构的细胞内转运和状态成像

附属公司

霍乱毒素AB5四级结构的细胞内转运和状态成像

P I巴斯蒂安等。 欧洲工商管理硕士J. .

摘要

用新型荧光共聚焦显微镜测定了荧光标记霍乱毒素暴露于活细胞后不同时间点的亚细胞定位和相应的四级态。通过测量硫氰酸染料Cy3标记的CTB与Cy5标记的CTA抗体之间的荧光共振能量转移(FRET),以像素-像素(像素-像素)为基础,评估了毒素的五聚体B亚基(CTB)与A亚基(CT)的分区和分离位点。FRET效率由一种新技术测定,该技术基于细胞内感兴趣区域内Cy5受体光破坏后Cy3供体的猝灭释放。结果表明,全毒素从质膜囊泡运输到高尔基体室,随后CTA和CTB亚单位分离。CTA亚单位通过内质网逆行转运重新定向到质膜,而CTB亚单位则存在于高尔基室中。

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