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.1996年8月15日;13(4):739-48.

三苯氧胺激活E1A和T24 H-ras转化的p53-/-小鼠胚胎成纤维细胞中表达的p53-雌激素受体融合蛋白诱导细胞凋亡

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  • PMID: 8761295

三苯氧胺激活E1A和T24 H-ras转化的p53-/-小鼠胚胎成纤维细胞中表达的p53-雌激素受体融合蛋白诱导细胞凋亡

C A Vater公司等人。 癌基因. .

摘要

由野生型p53组成的融合基因与小鼠雌激素受体的修饰配体结合域相连,该融合基因应该是研究野生型p5功能在各种实验细胞系统中的受控激活的有用工具。该基因的蛋白产物p53ERTM在细胞中组成性表达,但除非与他莫昔芬或4-羟基他莫昔酚相关,否则没有功能。将p53ERTM导入表达E1A和T24 H-ras癌基因的p53缺陷小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)。通过添加三苯氧胺或4-羟基三苯氧酚激活这些转化细胞中的p53,导致细胞凋亡。除了参与凋亡机制外,三苯氧胺激活的融合蛋白还表现出野生型p53特有的其他功能,如在用诺可达唑处理的细胞中诱导WAF1和MDM2基因表达以及激活p53依赖性纺锤体检查点。在p53阳性MEF中表达的p53ERTM的激活与E1A和ras共存,至多只有一个小的细胞毒性作用。当三个不表达p53ERTM的转化p53+/+成纤维细胞系对DNA损伤药物阿霉素的敏感性进行测试时,与几个p53-/-细胞系相比,p53+/-克隆表现出相当的敏感性,或至多药物敏感性增加不到四倍。我们的数据表明,野生型p53活性的恢复足以触发经E1A和T24 H-ras转化的p53-/-MEF的凋亡,并表明表达E1A和T34 H-rass癌基因的p53-normal MEF的罕见可繁殖克隆发生了代偿性改变,损害了p53依赖性凋亡的能力。

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