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.1996年6月1日;24(2):131-9.
doi:10.1002/(SICI)1097-0320(19960601)24:2<131::AID-CYTO5>3.0.CO;2米。

一种测量培养中粘附细胞凋亡过程中质膜不对称性损失的新方法

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一种测量培养中粘附细胞凋亡过程中质膜不对称性损失的新方法

M van Engeland先生等。 细胞计量学. .
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摘要

在凋亡过程的早期,细胞失去了磷脂膜的不对称性,并在细胞表面暴露磷脂酰丝氨酸(PS),同时保持其质膜的完整性。利用膜联蛋白V-FITC(一种对PS具有高亲和力的钙依赖性磷脂结合蛋白)和流式细胞术,可以监测悬浮细胞类型的这一过程。如果要研究这种凋亡相关现象的粘附细胞类型,那么就会遇到一个问题,即在采集过程中会发生特定的膜损伤。本文介绍了一种基于流式细胞术的方法,该方法可以测量培养中粘附细胞凋亡过程中磷脂不对称性的损失。该方法依赖于生物素化膜联蛋白V的磷脂结合特性。此外,使用这种结合物可以进行三色流式细胞术对凋亡进行分析。将该方法应用于由奥洛莫辛启动进入凋亡的MR65细胞,结果表明PS暴露发生在凋亡开始后的早期,并且在普遍的时间分辨率下,PS暴露伴随着细胞角蛋白和DNA的丢失。膜联蛋白V+细胞在DNA直方图中表现为特征性的G1亚峰。

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