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.1996年6月;133(5):1027-40.
doi:10.1083/jcb.133.5.1027。

异源三聚体G蛋白α亚基和β-γ亚基在胰腺高尔基体膜上的差异分布

附属公司

异源三聚体G蛋白α亚基和β-γ亚基在胰腺高尔基体膜上的差异分布

S P丹克等人。 J细胞生物学. 1996年6月.

摘要

众所周知,异三聚体G蛋白通过质膜(PM)受体参与信号传递。最近的数据表明,异源三聚体G蛋白也存在于细胞膜上,并可能沿胞外途径调节囊泡运输。我们利用亚细胞分馏和免疫细胞化学定位研究了Gα和Gβ-γ亚基在大鼠外分泌胰腺中的分布,该胰腺对蛋白质分泌高度专一。我们发现,Gαs、Gαi3和Gαq/11存在于95%以上不含PM的高尔基组分中。通过小麦胚芽凝集素(WGA)吸收去除残余PM并不会消耗Gα亚基。通过免疫印迹法,Gαs主要局限于TGN富集组分,而Gαi3和Gαq/11广泛分布于高尔基体组分。Gαs没有与TGN38或小窝蛋白共定位,这表明Gαs与不同的细胞膜群有关。在纯化高尔基体组分中几乎检测不到Gβ亚基。通过免疫荧光和免疫金标记,在颗粒物上检测到Gβ亚单位,但在高尔基体膜上未检测到,而在高尔基和颗粒物上均容易检测到Gαs和Gαi3。在酶原颗粒的膜上未发现Gα和Gβ亚基。这些数据表明,Gαs、Gαq/11和Gαi3与独立于Gβ亚单位的高尔基体膜相关,并且在高尔基体堆栈中具有独特的分布。Gβ亚基被认为可以将Gα锁定在GDP-结合形式,阻止其激活效应器,并帮助将其锚定在PM上。因此,高尔基体膜上存在游离Gα亚基具有几个重要的功能意义:它表明与高尔基体细胞膜相关的Gα亚单位处于激活状态,GTP结合形式或结合到其他一些未知蛋白质,可以替代Gβ-γ亚单位。它进一步暗示Gα亚单位通过翻译后修饰(例如,棕榈酰化)或通过与另一种蛋白质结合而与高尔基体膜相连。

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引用人

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参考文献

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