A highly recombinogenic system for the recovery of infectious Sendai paramyxovirus from cDNA: generation of a novel copy-back nondefective interfering virus

doi:10.1002/j.1460-2075.1995.tb00299.x

.1995年12月15日；14（24）：6087-94。

doi:10.1002/j.1460-2075.1995.tb00299.x。

从cDNA中回收感染性仙台副粘病毒的高重组系统：一种新的复制支持非缺陷性干扰病毒的产生

D加尔辛¹, T弹片, P卡兰, L罗克斯, J库伦, D科拉科夫斯基

附属机构

PMID： 8557028
预防性维修识别码：项目经理394733
DOI（操作界面）： 10.1002/j.1460-2075.1995.tb00299.x

从cDNA中回收感染性仙台副粘病毒的高重组系统：一种新的复制支持非缺陷性干扰病毒的产生

D加尔辛等人。欧洲工商管理硕士J. 1995.

.1995年12月15日；14(24):6087-94.

doi:10.1002/j.1460-2075.1995.tb00299.x。

作者

D加尔辛¹, T弹片, P卡兰, L罗克斯, J库伦, D科拉科夫斯基

附属

¹瑞士日内瓦大学医学院遗传与微生物学系。

PMID： 8557028
预防性维修识别码：项目经理394733
DOI（操作界面）： 10.1002/j.1460-2075.1995.tb00299.x

摘要

我们通过将该cDNA和表达核衣壳蛋白（NP）、磷酸蛋白和大蛋白的pGEM质粒转染到表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒感染的细胞中，从全长cDNA（FL-3）中恢复了感染性仙台病毒（SeV）。然后将这些细胞注射到鸡蛋中，SeV在鸡蛋中生长到非常高的滴度。FL-3在先导区用BglII位点标记，在NP基因的5'非翻译区用NsiI位点（ATGCAT）标记，创造了一个新的、框架外的、5'近端的AUG。所有产生的病毒库通过FL-3和pGEM-NP之间的点突变或重组，最终消除了NP表达的障碍。发现回收系统具有高度重组性。即使在没有选择压力的情况下，所产生的重组SeV中，仍有二十分之一的人将FL-3的NP基因与pGEM-NP的NP进行了交换。当包含新基因组3'末端的第五个质粒没有可能有害的BglII位点时，作为重组的另一个靶点，在12次回收中，有12次在重组SeV中发现新的基因组3'末端。使用这种方法，生成了一种新型的复制备份非缺陷病毒，该病毒会干扰野生型病毒的复制。

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